ICS 65.020.30 CCS B43 6103 宝 鸡 市 地 方 标 准 DB 6103/T 33—2022 奶山羊精液品质鉴定技术规范 Technical specification for semen quality identification of dairy goat 2022 - 07 - 30 发布 2022 - 08 - 30 实施 宝鸡市市场监督管理局 发 布 DB 6103/T 33—2022 目 次 前言 ................................................................................. II 1 范围 ............................................................................... 1 2 规范性引用文件 ..................................................................... 1 3 术语和定义 ......................................................................... 1 4 采精 ............................................................................... 2 5 检测 ............................................................................... 3 6 结果判定 ........................................................................... 3 7 鉴定记录 ........................................................................... 4 附录 A（规范性） 奶山羊精液品质显微镜检测方法 ......................................... 5 附录 B（规范性） 奶山羊精液分析仪检测方法 ............................................. 8 附录 C（规范性） 奶山羊精液品质鉴定登记表 ............................................. 9 I DB 6103/T 33—2022 前 言 本文件按照GB/T 1.1—2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 本文件由陇县畜产局提出。 本文件由宝鸡市农业农村局归口。 本文件起草单位：西北农林科技大学、陇县畜牧工作站、泾阳县动物卫生监督所、陕西省畜牧技术 推广总站、陕西省畜牧产业试验示范中心、陕西和氏高寒川牧业有限公司。 本文件主要起草人：边会龙、郑惠玲、朱梦笛、史怀平、王鹏飞、侯鸽利、王芳、黄桂姣、何晓学、 李文亮、赵少斌、王缠石、王 森、张敏飞、代军刚、张永刚。 本文件由陇县畜牧工作站负责解释。 本文件首次发布。 联系信息： 单位：陇县畜牧工作站 电话：0917-4601435 地址：陇县东大街126号 邮编：721200 II DB 6103/T 33—2022 奶山羊精液品质鉴定技术规范 1 范围 本文件规定了奶山羊精液品质鉴定的术语和定义、采精、检测、结果判定和鉴定记录的要求。 本文件适用于奶山羊种公羊原精液品质鉴定。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本 文件。 GB 20557-2006 山羊冷冻精液 NY/T 1234-2018 牛冷冻精液生产技术规程 NY/T 3186-2018 羊冷冻精液生产技术规程 3 术语和定义 NY/T 1234、NY/T 3186界定的以及下列术语和定义适用于本文件。 3.1 种公羊 stud buck 符合奶山羊品种标准、具有种用价值并参与正常配种的公羊。 3.2 采精 semen collection 使用采精器以获得公羊精液的操作方法。 [来源：NY/T 3186-2018，定义3.2] 3.3 精液 semen 由精子和精清两部分组成的混合液体。精子悬浮在液状的精清中。 3.4 原精液 original semen 采集后未经稀释处理的精液。 [来源：NY/T 3186-2018，定义3.1] 3.5 采精量 volume per ejaculate 种公羊一次采精时排出的精液量。 [来源：NY/T 1234-2018，定义3.6，有修改] 3.6 精子密度 sperm density 8 单位体积精液中的精子数。单位为10 个/mL。 1 DB 6103/T 33—2022 [来源：NY/T 3186-2018，定义3.3] 3.7 前进运动精子数 progressive motility 每毫升精液中呈前进运动的精子数。 [来源：GB 20557，定义3.1] 3.8 精子活力 sperm motility 在37℃环境下，精液中直线前进运动的精子数占总精子数的百分率。 [来源：GB 20557，定义3.2，有修改] 3.9 精子活率 sperm motility percentage 在37℃环境下，精液中活精子数占总精子数的百分率。 3.10 精子畸形率 abnormal sperm percentage 精液中畸形精子占总精子数的百分率。 [来源：GB 20557，定义3.3] 4 采精 4.1 基本要求 4.1.1 种公羊 应符合GB 20557-2006中4.1的要求。 4.1.2 采精员 经专业培训，取得相关资质。 4.1.3 采精室 地面清洁防滑，温度舒适，避免太阳光直射，环境安静。 4.1.4 精液处理室 应符合NY/T 3186-2018中4.1的规定，地面清洁，室温控制在18℃ ～ 25℃。 4.1.5 稀释液 商品稀释液按产品说明书使用。自制稀释液应按附录A.2.2.1精液的稀释方法配置。 4.1.6 器械清洗消毒 应按NY/T 3186-2018中附录A的要求执行。 4.2 精液采集 4.2.1 采精 应按NY/T 3186-2018中第5章的要求执行。用电子采精器时，按产品说明书操作。 2 DB 6103/T 33—2022 4.2.2 采精频次 配种季节， 1.5岁左右的青年种公羊采精≤2次/d，2. 5岁以上成年种公羊采精3次～ 4次/d。每天 连续采精2次以上时，中间间隔30 min ～ 60 min。 5 检测 5.1 精液处理 精液采集后，做好标记，30 min内常温避光保存，立即处理并检测。精液处理时放置在32℃ ～ 34℃ 恒温水浴锅中，完成检测。 5.2 检测项目 5.2.1 感官检测 5.2.1.1 射精量 用2mL吸管将集精杯的原精液吸入有刻度的集精管中，通过刻度管上的刻度值测量精液的量值（mL）。 5.2.1.2 颜色 目测集精杯或集精管中原精液的颜色。 5.2.1.3 云雾状 目测集精杯或集精管中的精液，精液呈翻腾滚动的云雾状态。 5.2.1.4 气味 一只手将装有原精液的集精杯或集精管放在距鼻子10 cm ～ 20 cm处，另一只手在瓶口轻微扇动， 嗅闻精液气味。 5.2.1.5 pH 用玻璃棒蘸取1滴精液于精密pH试纸上，对照比色。或用酸度计测定。 5.2.1.6 杂质 将装有原精液的集精杯或集精管放在光线充足处观察。 5.2.2 实验室检测 5.2.2.1 显微镜检测 应按附录A规定的方法测定。 5.2.2.2 精液分析仪检测 应按附录B规定的方法测定。 6 结果判定 6.1 判定要求 3 DB 6103/T 33—2022 评价种公羊时，每采精1次检测1次，取3次检测结果平均值，进行判定。 6.2 感官检测判定 6.2.1 原精液，乳白色或乳黄色、有云雾状、无味或略腥、pH6.4 ～ 7.1、无杂质，判定为合格精液。 6.2.2 感官检测判定为不合格的精液，均不做实验室检测。 6.3 实验室检测判定 8 6.3.1 原精液，精子密度≥ 20×10 /mL，精子活力≥70%，精子畸形率≤14％，判定为合格精液。 6.3.2 6.3.1 中任何一项不达标，均判定为不合格精液。 7 鉴定记录 7.1 鉴定记录应符合附录 C 的规定。 7.2 鉴定记录保存 2 年以上。 4 DB 6103/T 33—2022 A A 附 录 A （规范性） 奶山羊精液品质显微镜检测方法 A.1 精子密度测定 A.1.1 仪器、试剂 血球计数器、红细胞吸管或移液器、2mL吸管、显微镜或显微电视装置、显微镜保温箱或恒温装置、 药棉、小试管、试管架、水浴锅、白绸布；3.0%氯化钠溶液、蒸馏水、95%酒精、乙醚。 A.1.2 方法 A.1.2.1 精液稀释 A.1.2.1.1 红细胞吸管稀释：用红细胞吸管吸取原精液，吸至“0.5”刻度处，用药棉擦去吸管尖端外 围附着的精液，再吸 3.0%氯化钠至“100”刻度，用拇指和食指堵住吸管两头来回摇动混匀，成为 200 倍稀释精液。 A.1.2.1.2 移液器稀释：用移液器吸取 10 L 原精液，再加入 1990 L（在小试管内先配制 2 mL，再 吸出 10 L 弃去）3.0%氯化钠，混匀，成为 200 倍稀释精液。 A.1.2.2 精液计数 A.1.2.2.1 将盖好盖玻片的血球计数板置于显微镜下低倍观察（显微镜恒温台温度 37℃），找到清晰 的计数室。弃去吸管或移液器中的前 2 滴，再将尖端置于血球计数室和盖玻片交界处的边缘上，精液自 动渗入计数室内。要求精液均匀充满计数室，无气泡、不溢出。静置 2 min，开始计数。 A.1.2.2.2 将充满精液的血球计数板置于显微镜下放大 250 倍～400 倍或电子荧光屏上观察计数，数 出四角和正中间 5 个中方格（80 个小方格）中的精子数和直线前进运动的精子数。精子压住血球计数 室的线，以精子头为准，按照“数上不数下，数左不数右”的原则计数。每个样品重复测定 3 次，取平 均值。 A.1.3 计算 A.1.3.1 精子密度 精子密度按公式（A.1）计算： 1mL原精液内的精子数=5个中方格的精子数×5×10×1000×精液稀释倍数………………….(A.1) A.1.3.2 前