ICS 65.020.30 B 47 DB51 四 川 省 地 方 标 准 DB51/T 657—2014 代替 DB51/T 657-2007 蜜蜂检疫技术规范 2014 - 09 - 19 发布 四川省质量技术监督局 2014 - 10 - 01 实施 发 布 DB51/T 657—2014 目 次 前 言 ............................................................................... II 1 范围 .............................................................................. 1 2 术语和定义 ........................................................................ 1 3 检疫对象 .......................................................................... 1 4 检疫合格标准 ...................................................................... 1 5 临床检查与判断 .................................................................... 2 6 实验室检测与判定 .................................................................. 3 I DB51/T 657—2014 前 言 本标准于2007年3月首次发布，2014年5月第一次修订。自本标准实施之日起，原标准DB51/T 657-2007 同时废止。 本标准由四川省农业厅提出并归口。 本标准由四川省质量技术监督局批准。 本标准由四川省蜂业管理站、四川省蜂业技术开发研究所起草。 本标准起草人：王顺海、李念周、邹志坚、唐友海、罗勤、刘文其、向代建。 II DB51/T 657—2014 蜜蜂检疫技术规范 1 范围 本标准规定了蜜蜂检疫的检疫对象、检疫合格标准、临床检查、实验室检测与判定。 本标准适用于四川省境内蜜蜂的检疫。 2 术语和定义 下列术语及定义适用于本标准。 2.1 封盖子房 内有蜜蜂幼虫、蛹的封盖巢房。 2.2 穿孔 由于蜜蜂病虫害而引起的封盖子房房盖出现针头大小的孔洞。 2.3 花子 蜜蜂子脾因蜂病造成卵、幼虫、封盖子房、空房间杂排列的现象。 2.4 蜂螨平均寄生密度 指平均每只蜜蜂身体上寄生的蜂螨的数量，一般以数值标示。 3 检疫对象 美洲幼虫腐臭病 American Foul-brood Disease、欧洲幼虫腐臭病 European Foul-brood Disease、 大 蜂 螨 病Varroa Mite、小 蜂 螨 病 Tropilaelaps Clareae、白 垩 病 Chalk Brood Disease、蜜 蜂 孢子虫病 Nosemosis of Bees 。 4 检疫合格标准 4.1 蜂场所在地县级区域内未发生本标准规定的动物疫病。 4.2 蜂群临床检查健康。 4.3 蜂群未发生美洲幼虫腐臭病、欧洲幼虫腐臭病、蜜蜂孢子虫病、白垩病及其它规定的疫病，蜂 螨平均寄生密度在 0.1 以下。 1 DB51/T 657—2014 4.4 5 必要时实验室检测合格。 临床检查与判断 5.1 检查方法 5.1.1 蜂群检查 5.1.1.1 箱外观察 调查蜂群来源、转场、蜜源、发病及治疗等情况，观察全场蜂群活动状况、核对蜂群箱数，观察蜂 箱门口和附近场地蜜蜂飞行及活动情况，有无爬蜂、死蜂和蜂翅残缺不全的幼蜂。 5.1.1.2 抽样检查 按照至少5%（抽查总数不少于5箱）的比例抽查蜂箱，依次打开蜂箱盖、副盖，检查巢脾、巢框、 箱壁和箱底的蜜蜂有无异常行为；查看箱底有无死蜂；子脾上卵虫排列是否整齐，色泽是否正常。 5.1.2 个体检查 对成年蜂和子脾进行检查。 5.1.2.1 成年蜂 主要检查蜂箱门口和附近场地上蜜蜂的状况。 5.1.2.2 子脾 每群蜂取封盖或未封盖子脾2张以上，主要检查子脾上的未封盖幼虫或封盖幼虫和蛹的状况。 5.2 检查内容与判断 5.2.1 美洲幼虫腐臭病 子脾上出现幼虫虫龄极不一致，卵、小幼虫、大幼虫、蛹、空房花杂排列（俗称“花子现象”）， 在封盖子脾上，巢房封盖出现发黑，湿润下陷，并有针头大的穿孔，腐烂后的幼虫（9日龄～11日龄） 尸体呈黑褐色并具有粘性，挑取时能拉出 2cm ～ 5cm 的丝；或干枯成脆质鳞片状的干尸，有难闻的腥 臭味，怀疑感染美洲幼虫腐臭病。 5.2.2 欧洲幼虫腐臭病 5.2.3 欧洲幼虫腐臭病 在未封盖子脾上，出现虫卵相间的“花子”现象，死亡的小幼虫（2日龄～4日龄）呈淡黄色或黑褐 色，无粘性，且发现大量空巢房，有酸臭味，怀疑感染欧洲幼虫腐臭病。 5.2.4 蜜蜂孢子虫病 在巢框上或巢门口发现黄棕色粪迹，蜂箱附近场地上出现黑头黑尾、腹部膨大、腹泻、失去飞翔能 力的蜜蜂，怀疑感染蜜蜂孢子虫病。 5.2.5 2 蜜蜂白垩病 DB51/T 657—2014 在箱底或巢门口发现大量体表布满菌丝或孢子囊，质地紧密的白垩状幼虫或近黑色的幼虫尸体时， 怀疑感染蜜蜂白垩病。 5.2.6 蜂螨病 在巢门口或附近场地上出现蜂翅残缺不全或无翅的幼蜂爬行，以及死蛹被工蜂拖出等情况时，怀疑 感染蜂螨病。 6 实验室检测与判定 对怀疑患有本规程规定疫病或临床检查发现其他异常的，应进行实验室检测 6.1 美洲幼虫腐臭病 从蜂群中抽取部分封盖子脾，挑取其中的死幼虫 5只～10只，置研钵中，加 2ml～3ml无菌水研碎 后制成悬浮液、涂片，经革兰氏染色，在1000倍～1500倍的显微镜下进行检查，发现大量革兰氏阳性的 游离状的杆菌芽孢，经细菌培养鉴定确认后，判定为美洲幼虫腐臭病。 6.2 欧洲幼虫腐臭病 从蜂群中抽取部分未封盖 2日龄～4日龄幼虫脾，挑取其中的死幼虫 5只～10只，置研钵中，加 2ml～3ml无菌水研碎后制成悬浮液、涂片，经革兰氏染色后，在1000倍～1500倍的显微镜下进行检查， 发现0.5μm×1.0μm 呈革兰氏阳性的单个、短链或呈簇状排列的披针形球菌，同时有许多杆菌和芽孢 杆菌等多种微生物，经细菌培养鉴定确认后，判定为欧洲幼虫腐臭病。 6.3 蜜蜂孢子虫病 在蜂箱门口与蜂箱上梁处避光收集8日龄以下的成年工蜂60只，取出30只（另30只备用）消化系统， 置研钵中，加 2ml～3ml无菌水研碎后制成悬浮液，置干净载玻片上，在400倍～600倍的显微镜下进行 检查，若发现卵圆近米粒形，边缘灰暗，具有蓝色折光的孢子，经细菌培养鉴定确认后，判定为蜜蜂孢 子虫病。 6.4 蜜蜂白垩病 从病死僵化的幼虫体表刮取少量白垩状物或刮取黑色物体在显微镜下进行检查，发现有白色棉絮菌 丝和充满孢子球的子囊，经细菌培养鉴定确认后，判定为蜜蜂白垩病。 6.5 蜂螨病 从2个以上子脾中随机抽取50只蜂蛹，在解剖镜下（或其它方式）逐个检查蜂蛹体表有无蜂螨寄生。 其中一个蜂群的蜂螨平均寄生密度达到0.1以上，判定为蜂螨病。 _________________________________ 3 DB51/T 657—2014