ICS 65.150 B 52 DB34 安 徽 省 地 方 标 准 DB 34/T 2479—2015 青虾亲本质量要求 The quaility standards of shrimp parents 文稿版次选择 2015 - 09 - 08 发布 安徽省质量技术监督局 2015 - 10 - 08 实施 发 布 DB34/T 2479—2015 前 言 本标准按照 GB/T 1.1-2009 给出的规则起草。 本标准由安徽农业大学提出。 本标准由安徽省农业标准化技术委员会归口。 本标准起草单位：安徽农业大学、当涂县水产局和当涂县苦菜圩水产养殖有限公司。 本标准起草人：张晓华、奚业文、韦众、陶红革、杨传萍、陈晓芳、张桂芝、曹义林。 I DB34/T 2479—2015 青虾亲本质量要求 1 范围 本标准规定了青虾[日本沼虾 Macrobranchium nipponense (de Haan)]亲本质量的种质、选择等要 求。 本标准适用于青虾的良种亲本选择。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T 18654.12 养殖鱼类种质检验 第12部分:染色体组型分析 GB 20555-2006 日本沼虾 3 亲本种质 3.1 学名与分类 3.1.1 学名 日本沼虾 （Macrobranchium nipponense (de Haan)） 3.1.2 分类地位 节肢动物门（Arthropoda）、甲壳纲(Crustacea)、十足目(Decapoda)、游泳亚目(Natatia)、长臂 虾科(Paleamonidea)、沼虾属(Macrobranchium)。 3.2 外部形态与内部构造 符合 GB 20555-2006 中 4.1.1～4.1.3、4.2 的要求。 3.3 可量性状 良种青虾亲本主要可量性状见表1。 检测方法见附录A。 表1 良种青虾亲本主要可量性状 雌性 雄性 （♀） （♂） 头胸甲长/体长 0.29±0.02 0.32±0.04 头胸甲宽/体长 0.18±0.01 0.18±0.02 腹部宽/体长 0.17±0.01 0.16±0.02 项目 1 DB34/T 2479—2015 表 1（续） 雌性 雄性 （♀） （♂） 第二步足长/体长 0.81±0.07 1.30±0.24 肥满度 1.94±0.15 1.85±0.16 项目 3.4 生长 从幼虾到成虾，雌雄生长模式不同，且春季越冬群体和夏季种群的生长模式也不同。 参见表2。 表2 青虾生长方程 雌 种群 雄 （♀） （♂） -0.5798(t+0.5183) 春季 Lt=3.07[1-e ] （r=0.956） -0.5798(t+0.5183) Wt=1.05[1-e ] 1.604-0.2385t 秋季 Lt=5.64/(1+e (r=0.920) ) (r=-0.978) 4.203-0.3307t Wt=7.56/(1+e 2.97 ) (r=-0.968) -0.4943(t+0.1672) Lt=3.38[1-e Wt=1.40[1-e ]（r=0.960） -0.4943(t+0.1672) 3.03 ] 2.1805-0.2787t Lt=6.57/(1+e ) 4.8852-0.3764t Wt=13.15/(1+e (r=0.941) (r=-0.968) ) (r=-0.974) 3.5 遗传学特征 细胞遗传学特性和生化遗传学特性指标详见附录B。 4 亲本选择 4.1 来源 选用池塘培育的群体、源于沿长江、淮河湖泊野生青虾，每 2 年全部更新。 4.2 选择时间 春繁亲本每年4月20日至5月20日之间，秋繁亲本每年8月5日至25日之间。 4.3 雌雄区别 同龄个体，雄性大于雌性；雄性第 2 步足特别强大，长度为体长的 1.2～1.7 倍，雌性第 2 步足 较细弱，长度不足体长的 1 倍；雄性生殖孔位于第五步足基部内侧，雌性生殖孔位于第三步足基部内 侧；雄性第二腹肢的内肢各有 1 棒状附肢，雄附肢表面有刚毛，长度约为内肢的一半，雌性无；雌性 腹部第 4、5 步足基部的距离较宽，呈“八”字形；雄性较窄。 参见图1、图2、图3、图4。 2 DB34/T 2479—2015 图 1 雌雄青虾腹部（示第二步足） 图 2 腹部放大（示第 4、5 步足基部形态） 图 3 雄性第二附肢（示雄性附肢） 图 4 雌性第二附肢（示与雄性附肢区别） 4.4 体色 青绿色，带有棕色斑纹。 4.5 形态与行为标准 形态符合 GB 20555-2006 中 4.1 的要求，并要求无病、附肢完整，行动活泼、肥壮、规格一致。 4.6 规格 春繁亲本雌虾体长（BL）≥45 mm，雄虾体长≥50 mm；秋繁亲本雌虾体长（BL）≥35 mm，雄虾体 长≥40 mm。 4.7 怀卵量 春繁亲本绝对怀卵量卵 2000～4000 粒，秋繁亲本绝对怀卵量卵 1000～2000 粒，卵颜色为绿色或 橘黄色。 3 DB34/T 2479—2015 AA 附 录 A （规范性附录） 检测方法 A.1 形态生物学检测 A.1.1 抽样与测量 随机取 50 尾成体青虾进行生物学检测，主要测量指标有：体长( BL) 、头胸甲长( CL) 、头胸甲 宽( CW) 、腹长( AL) 、腹宽 ( AW) 、尾扇长 ( PL) 、额剑长( RL)、第二步足长(P2L)（精确到 0.2 mm）； 体质量( BW) 、卵质量( EW) （精确到 0.001 g）。 参见图A.1. 图A.1 青虾主要形态性状 A.1.2 抱卵量计数方法 选取抱卵虾，逐尾将卵取出后在显微镜下计数。 A.2 染色体分析 A.2.1 取材与预处理 4 DB34/T 2479—2015 取材以青虾精巢为佳，从雄虾腹部第 1、2 节侧甲缝中注射秋水仙素，浓度 1.5 ug/g，处理 4～6 h 后，在解剖镜下取精巢。 A.2.2 低渗与固定 将精巢剪成 2～3 mm 大小，置于含低渗液（0.075 mol/L kcl)烧杯中，于 37℃环境中低渗处理 30 min。小心弃去低渗液，沿烧杯壁加入新配置的 4℃预冷的 Carnoy 固定液（乙醇：冰乙酸=3:1），放 入 4℃冰箱中固定 1 h，期间更换 2～3 次固定液。 A.2.3 制片、染色、计数、组型分析 按 GB/T 18654.12 的规定执行。 A.3 生化遗传学分析 A.3.1 样品采集、制备与电泳 按照 GB 20555 的规定执行。 A.3.2 检测规则与结果评判 按 GB/T 18654.12 的规定执行。 5 DB34/T 2479—2015 BB 附 录 B （资料性附录） 青虾的遗传学特性 B.1 细胞遗传学特征 体细胞染色体数 2n=104，染色体臂数 NF=178；核型组成为：n=16M+21SM+4ST+11T。 参见图B.1。 图B.1 青虾染色体组型图 B.2 生化遗传学特征 B.2.1 苹果酸脱氢酶（MDH） 经染色，健康成体青虾肌肉组织 MDH 有 5 条酶带，同工酶谱见图B.2，各酶带的相对迁移率见表 B.1。 图B.2 青虾肌肉组织 MDH 同工酶电泳图谱 6 DB34/T 2479—2015 表B.1 青虾肌肉组织 MDH 各酶带相对迁移率 项目 相对迁移率％ B.2.2 酶带 MDH1 MDH2 MDH3 MDH4 MDH5 0.13 0.17 0.23 0.29 0.32 酯酶（EST） 经染色，健康成体青虾肌肉组织 EST 有 5 条酶带（见图B.3）。各酶带的相对迁移率见表B.2。 图B.3 青虾肌肉组织 EST 同工酶电泳图谱 表B.2 青虾肌肉组织 EST 各酶带相对迁移率 项目 相对迁移率％ 酶带 EST1 EST2 EST3 EST4 EST5 0.08 0.325 0.375 0.71 0.74 _________________________________ 7