ICS 65.140 B 47 DB13 河 北 省 地 方 标 准 DB 13/T 2347—2016 中红侧沟茧蜂人工繁育技术规程 2016 - 05 - 23 发布 河北省质量技术监督局 2016 - 07 - 01 实施 发 布 DB13/T 2347—2016 前 言 本标准按GB/T 1.1-2009给出的规则编写。 本标准由河北省农林科学院提出。 本标准起草单位：河北省农林科学院植物保护研究所。 本标准起草人：李建成、路子云、冉红凡、刘文旭、马爱红、屈振刚。 I DB13/T 2347—2016 中红侧沟茧蜂人工繁育技术规程 1 范围 本标准规定了中红侧沟茧蜂Microplitis mediator（Haliday）以粘虫为繁育寄主的人工繁育技术 的术语和定义、粘虫的人工饲养和中红侧沟茧蜂繁育的环境条件、种源、方法等内容。 本标准适用于以粘虫为中间寄主的中红侧沟茧蜂的人工繁育。 2 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 2.1 中红侧沟茧蜂 属膜翅目Hymenoptera茧蜂科Braconidae，是重要的农业害虫天敌，其寄主涉及到鳞翅目夜蛾科和 尺蛾科的40多种昆虫，其中包括棉铃虫Helicoverpa armigera （Hubner）、粘虫Mythimna separata （Walker）、地老虎Agrotis ypsilon (Rottemberg)和甘蓝夜蛾Mamestra brassicae （Linnaeus）等。 2.2 粘虫人工饲料 用于人工饲养粘虫的饲料，人工饲料配方及制作方法见附录C。 2.3 滞育茧 处于滞育状态的中红侧沟茧蜂蜂茧，颜色为褐色，纺锤形，长×宽= 4.5 mm×1.5 mm，重3.8 mg～ 4.4 mg，0℃～4℃可保存一年。 2.4 发育茧 处于发育状态的中红侧沟茧蜂蜂茧，颜色为绿色，纺锤形，长×宽= 4.6 mm×1.7 mm，重3.2 mg～ 3.7 mg，0℃～4℃可保存7d～10d。 3 人工繁育环境条件 3.1 厂房条件 厂房水电设施齐全、具有良好的防水、保温性能，周围植物稀少或可严密隔离。 3.2 车间组成 1 DB13/T 2347—2016 由人工饲料制备室、粘虫养殖室、接蜂室、繁蜂室、消毒室、质量检测室、包装车间、恒温冷藏室、 原材料库组成。 3.3 配套设施 3.3.1 通风系统 在各养殖室内安装通风设备，通风口用60目纱网隔离。 3.3.2 控温、控湿系统 采用全自动温湿度调控系统控制环境条件；粘虫幼虫饲养室环境条件为温度：26℃±1℃，相对湿 度3龄以下幼虫70%～80%，4龄以上幼虫为60%～70%；成虫饲养室环境条件为温度21℃±1℃，相对湿度 为75%～85%，光周期为L∶D=12∶12。发育茧繁殖条件温度为26℃±1℃，相对湿度60%～70%，光周期 L∶D=14∶10；滞育茧繁殖条件温度为16℃±1℃，相对湿度60%～70%，光周期L∶D=10∶14。 3.3.3 防逃逸设施 在门口设置隔离间，在通风口、窗户等处设置防虫网，防止幼虫和成虫逃逸。 4 粘虫的人工饲养 4.1 粘虫种源 由玉米田间采集幼虫，室内继代培养，挑选生长发育良好，健康的个体作为种源。粘虫鉴定特征见 附录B。 4.2 粘虫卵 4.2.1 粘虫卵的收集 以聚丙烯塑料绳为产卵底物，将其穿入产卵箱顶层事先挖好的小孔中，末端系扣防止塑料绳脱落； 塑料绳长度以达到或超过产卵箱底部为准，每天收集有粘虫卵的塑料绳。 4.2.2 粘虫卵的保存 将每天收集的粘虫卵放入保鲜袋中，置于温度0℃～4℃的冰箱内保存。 4.2.3 粘虫卵的消毒 将带有粘虫卵的塑料绳先用无菌水冲洗2～3遍，然后用4%甲醛溶液浸泡10min，最后再用无菌水冲 洗2～3遍，充分晾干。 4.2.4 粘虫卵的孵化 晾干的有粘虫卵塑料绳放入保鲜袋，加少许玉米苗保湿。放入温度26℃±1℃，光周期为L∶D=12∶12 的光照培养箱中使其孵化，卵孵化后转入养虫袋内饲喂。 4.3 粘虫幼虫 4.3.1 养虫袋 2 DB13/T 2347—2016 养虫袋用100目锦纶纱制成，长、宽均为33cm，袋口用塑料拉杆封住。袋内放入U形铁丝，撑起一定 空间，供幼虫在其间取食活动。此袋可供养1～2龄小幼虫1000头左右，3～4龄幼虫200～300头，5龄以 上幼虫70头左右。 4.3.2 粘虫低龄幼虫饲养 1～3龄粘虫小幼虫需选择较鲜嫩的玉米苗作为饲料在养虫袋中饲养，在养虫袋内每天加入100g～ 200 g新鲜玉米苗供幼虫食用。每天清除虫粪和更换饲料，操作时注意把残余在玉米芯叶内的幼虫收回， 防止幼虫丢失；待幼虫到达3龄及时调整养虫袋内幼虫密度。 4.3.3 粘虫大龄幼虫饲养 幼虫到达4龄后用人工饲料在养虫袋饲养，人工饲料配方及配制方法见附录C。此时幼虫取食量、排 粪量不断增加，每天添加60g～120g人工饲料，必须保证养虫袋每饲料的足量供应和及时清除粪便。同 时随着幼虫的生长及时调整幼虫密度并且剔除病虫，5龄前每袋供养200头左右，5龄后每袋供养70头左 右。养虫室内要注意通风换气，此时幼虫适宜的环境温度为26℃±1℃，湿度为60%～70%，光周期为 L∶D=12∶12。 4.4 粘虫蛹 4.4.1 粘虫化蛹盒 用长35cm，宽25cm，高10cm的塑料盒供粘虫化蛹，盒盖中间配有纱网。 4.4.2 粘虫化蛹 将6龄幼虫挑出放入化蛹盒内，每盒可放幼虫100～150头。盒底铺有3～5层吸水纸，喷洒适量水并 放少量玉米苗保湿。 4.4.3 粘虫蛹收集 待粘虫化蛹3d后收集蛹。 4.4.4 粘虫蛹消毒 将蛹放入4%甲醛溶液浸泡20min，然后用清水冲洗2～3遍。 4.4.5 粘虫蛹羽化 将消毒后的蛹放入与化蛹盒内，盒底放3～5层吸水纸，用湿毛巾盖在盒子顶部。放入温度为26℃ ±1℃，湿度为75%～85%，光周期为L∶D=12∶12的养虫室内使其羽化。 4.5 粘虫成虫 4.5.1 粘虫成虫营养补充 成虫羽化后需饲喂10%蜂蜜水以补充营养。将80ml～100ml 10%蜂蜜水倒入容积250ml三角瓶中，用 脱脂棉制作一灯芯状吸绳，一端插入蜂蜜水中，另一端在瓶口，供粘虫成虫取食。 4.5.2 粘虫成虫产卵箱 产卵箱规格为50cm×35cm×55cm，框架、底座、后座为铝合金材料，前面为玻璃推拉门，其余面为 不锈钢纱网，每笼可供300头左右成虫产卵。 3 DB13/T 2347—2016 4.5.3 粘虫成虫产卵 在产卵箱内放置300头粘虫成虫，雌雄虫随机。箱顶盖上湿毛巾保湿，成虫3天后开始产卵，产卵介 质为聚丙烯塑料绳。 5 中红侧沟茧蜂的繁育 5.1 中红侧沟茧蜂种源 在非抗虫棉田采集棉铃虫幼虫，通过室内饲养获得自然蜂种。中红侧沟茧蜂鉴定特征见附录A。 5.2 中红侧沟茧蜂接种箱 接种箱规格为40cm×35 cm×35cm的透明盒，前盖带有60目的锦纶纱网以保持盒子的通透性。 5.3 中红侧沟茧蜂接种 在中红侧沟茧蜂羽化后按雌雄1:1的比例放入蜂箱（雌雄鉴别见附录A），并使之交配48h。然后在 接蜂箱底部放150g～200 g玉米苗，并饲喂10%蜂蜜水以补充营养。接蜂时，在箱内放入交配后的中红侧 沟茧蜂雌蜂100头，箱底部放入2龄～2龄末的粘虫幼虫2000头，封闭好箱盖以防粘虫幼虫逃逸。接种24h 后取出被寄生粘虫幼虫，并更换下一批粘虫幼虫。 5.4 被寄生粘虫幼虫饲养 将接种24h的粘虫幼虫过筛后，放入养虫袋，幼虫密度为每袋500头。每天更换饲料并清除粪便，及 时剔除病虫和未寄生幼虫。饲养控制条件因繁育滞育茧和发育茧而不同（见5.5）。 5.5 中红侧沟茧蜂蜂茧的繁育 5.5.1 发育茧的繁育 将被寄生的粘虫幼虫在温度26℃±1℃，L∶D=14∶10，相对湿度65%～75%的条件下饲养，一般10d 左右即可出茧。 5.5.2 滞育茧的繁育 将被寄生的粘虫幼虫在温度16℃±1℃，L∶D=10∶14，相对湿度65%～75%的条件下饲养，一般25d 左右出茧。 5.6 中红侧沟茧蜂蜂茧贮存 5.6.1 发育茧的贮存 将发育茧放到底部有湿沙土的玻璃瓶中保湿，置于温度0℃～5℃的冷藏箱，可存放7d～10d。 5.6.2 滞育茧的贮存 将滞育茧放到底部有湿沙土的玻璃瓶中保湿，置于0℃～5℃的冷藏箱，可存放一年左右。 4 DB13/T 2347—2016 AA 附 录 A （资料性附录） 中红侧沟茧蜂形态特征 A.1 成虫 中红侧沟茧蜂Microplitis mediator （Haliday） ♀ 体长 3 mm。 头 触角丝状，18节，深黑，长4.20mm～5.00 mm，约与体等长。横形，向后圆形收窄。颜面和颊具 革状细皱。额和头顶具细刻点。唇基基部稍隆起，与颜面微分开；幕骨陷深。颚眼距稍长于上颚基宽。 单复眼间距约为单眼直径的2.8倍。 胸 前胸背板侧方光滑，中央凹陷，内有短横脊。中胸盾片及小盾片具皱状刻点；盾纵沟由浅而细 的皱显出；小盾片前凹内具纵脊。中胸侧板前方具皱状刻点，中央侧沟之后平滑有光泽。后胸侧板满布 粗糙皱纹。 翅 径脉从翅痣中央发出；第2肘室四边形，向端部狭；第1肘间横脉与肘脉第1段端或肘脉第2段着 色部位等长；小脉在基脉外方，其距稍短于小脉本身长度。 腹 并胸腹节具网状粗皱；中纵脊明显。第一背板长约为宽的2倍，满布皱纹，中央稍纵凹，侧缘几 乎平行，端部圆，后端中央有明显的光滑小隆丘；其余背板光滑。 体色 体黑色，腹部有时呈黑褐色，第2+3节背板赤黄色；触角黑褐色，柄节基部多半红褐色。须淡 黄色；足赤黄色，基部或中后足基节基部黑褐色；翅基片淡赤色，翅稍带烟褐色，翅痣和翅脉暗褐色， 翅痣基部有黄白色斑。 ♂ 触角较粗且长，上颊稍长于复眼横径。其余同♀。 A.2 卵 中红侧沟茧蜂产生无卵黄卵，初产卵长 289.94±30.9μm，卵椭圆型，稍微有点儿弯曲，颜色 为乳白色或无色透明。 A.3 幼虫 中红侧沟茧蜂将卵产于寄主体内，幼虫在寄主体内生长发育。其发育时期随着温度和湿度的 不同而不同，一般为 6d～11d，中红侧沟茧峰幼虫有 3 个龄期。初孵幼虫长 0.51 mm、宽 0.12mm，腹部 扁平，非常活跃；头部高度骨化，头长 0.12mm、宽 0.21mm，比身体其余部分宽，具l对触角和 1 对运用 自如的角质化的颚；体色乳白色，有 13 节，最后 1 节长 80μm、宽 40μm，呈圆锥型尾巴状。随着幼虫 的生长，在尾丝的背侧面凸出 1 个球状器官，该器官为尾囊，尾巴消失，这时幼虫体长 1.77mm、宽 0.51mm。在产卵后 108h～113h，1 龄幼蜂开始蜕皮；2 龄幼蜂为无头型，尾囊发达，可见 10 节腹节。 在寄生后 7d～8d，3 龄幼蜂在寄主腹节 4～