(19)国家知识产权局 (12)发明 专利 (10)授权公告 号 (45)授权公告日 (21)申请 号 202111178049.2 (22)申请日 2021.10.09 (65)同一申请的已公布的文献号 申请公布号 CN 113816817 A (43)申请公布日 2021.12.21 (73)专利权人 山东大学 地址 250012 山东省济南市历下区文化西 路44号 (72)发明人 孙蓉　王岱杰　吴东进　宋祥云　 杜航　黄娜娜　钟颖　李建超　 郭崇　李晓骄阳 　刘闰平　朴政一　 (74)专利代理 机构 济南圣达知识产权代理有限 公司 372 21 专利代理师 宋海海(51)Int.Cl. C07C 1/207(2006.01) C07C 7/12(2006.01) C07C 13/48(2006.01) A61P 35/00(2006.01) 审查员 王莹 (54)发明名称 一种倍半萜烯异构体衍生物高效转化和高 纯度单体制备方法及其在抗肿瘤药物中的应用 (57)摘要 本发明提供一种倍半萜烯异构体衍生物高 效转化和 高纯度单体制备方法及其在抗肿瘤药 物中的应用， 属于化合物制备和单体化合物分离 技术领域。 所述制备方法至少包括： 将吉马酮转 化为芹子烯， 并使用高速逆流 色谱和制备型HPLC 分离提取， 获得芹子烯三种构型单体； 所述高速 逆流色谱中溶剂系统为含Ag+的正己烷/甲醇/ 水。 本发明提供的制备方法具有简单、 分离度好、 纯度高等优点， 为倍半萜烯异构体衍生物等相关 化合物的提取分析提供了新的解决方法， 具有良 好的实际应用之价 值。 权利要求书2页 说明书9页 附图5页 CN 113816817 B 2022.09.16 CN 113816817 B 1.一种倍半萜烯异构体衍生物高效转化和高纯度单体的制备方法， 其特征在于， 所述 制备方法至少包括： 将榄香烯转化为芹子烯， 并使用高速逆流色谱和制备型HPLC分离提取， 获得芹子烯三 种构型单体； 所述高速逆流色谱中溶剂系统为含Ag+的正己烷/甲醇/水。 2.如权利要求1所述的制备方法， 其特征在于， 所述榄香烯转化为芹子烯具体方法为： 向榄香烯溶 液中加入硅胶和磷酸水 溶液， 在高温下进行反应即得。 3.如权利要求2所述的制备方法， 其特征在于， 所述榄香烯与硅胶的体积质量为100 ‑ 500 μL： 1‑20 mg。 4.如权利要求2所述的制备 方法， 其特 征在于， 所述磷酸水 溶液浓度控制为1 ‑100%。 5.如权利要求2所述的制备方法， 其特征在于， 所述高温条件具体温度控制为30 ‑130 ℃。 6.如权利要求2所述的制备 方法， 其特 征在于， 所述反应时间在1 ‑60 min。 7.如权利要求2所述的制备方法， 其特征在于， 采用液相色谱法监测反应过程和产物， 所述液相色谱法检测条件包括： 色谱柱为C18柱， 流动相： 甲醇 ‑水， 甲醇和水的体积比为： 95: 5； 检测波长： 20 0‑220 nm； 流速： 0.5 ‑5 mL/min。 8.如权利要求7所述的制备方法， 其特征在于， 所述检测波长为206  nm； 流速为1.0  mL/ min。 9.如权利要求1所述的制备方法， 其特征在于， 所述使用高速逆流色谱和制备型HPLC分 离提取具体方法为： 在HSCCC分离中， 选择正己烷/甲醇/硝酸银溶液的上相作为流动相， 下相作为固定相， 正己烷/甲醇/硝酸银溶液体积比为10:  9.5:0.5， 其中硝酸银溶液中Ag+浓度控制为1 ‑5  mol/L。 10.如权利要求9所述的制备方法， 其特征在于， 固定相以10~30 mL/min的流速注入 HSCCC分离柱； HSCCC在25~35℃下以600~800 rpm转速顺时针旋转， 流动相以1.0~5.0 mL/ min流速， 以尾端到首端的模式泵入HS CCC分离柱； 当达到流体力学平衡后， 样品溶液通过进 样阀进样。 11.如权利要求10所述的制备方法， 其特征在于， 所述固定相流速为20  mL/min； 所述 HSCCC在30℃下以80 0 rpm转速顺时针旋转， 所述 流动相流速为2.0  mL/min。 12.如权利要求10所述的制备方法， 其特征在于， 所述样品溶液是榄香烯转化为芹子烯 后获得的样品溶解于正己烷 ‑甲醇‑硝酸银溶液的上相和下相后所 得。 13.如权利要求9所述的制备方法， 其特征在于， 所述HSCCC  分离过程还包括： 用紫外 ‑ 可见检测器在210  nm处连续 监测柱的流出物； 使用自动进样器 每1‑6 min对馏分进行收集； 分离后， 用氮气吹出HSCCC分离柱中溶剂； 吹出的溶剂进行真空浓缩， 残渣用正己烷萃 取； 弃去上层， 下层水相真空浓 缩至干， 回收硝酸银。 14.如权利要求13所述的制备方法， 其特征在于， 所述自动进样器每5  min对馏分进行 收集。 15.如权利要求9所述的制备方法， 其特征在于， 采用制备型HPLC进一步分离； 具体方法 包括： 以C18半制备色谱柱进行 分离， 制备液相条件： 甲醇 ‑水， 甲醇和水的体积比为： 92:8， 流权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 113816817 B 2速： 5‑20 mL/min， 进样量5 0‑200 μL。 16.如权利 要求15所述的制备方法， 其特征在于， 所述流速为10  mL/min， 所述进样量为 100 μL。 17.如权利要求13所述的制备方法， 其特征在于， 用紫外 ‑可见检测器在200 ‑220 nm处 连续监测柱的流出物； 使用自动进样器 每0.5‑3 min对馏分进行收集。 18.如权利要求17所述的制备方法， 其特征在于， 用紫外 ‑可见检测器在206  nm处连续 监测柱的流出物； 使用自动进样器 每1 min对馏分进行收集。权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 113816817 B 3