ICS 65.150 CCS B 52 DB63 青 海 省 地 方 标 准 DB 63/ T XXXX—2021 青海湖裸鲤受精卵脱粘技术规范 点击此处添加标准英文译名 点击此处添加与国际标准一致性程度的标识 （报批稿） XXXX - XX - XX 发布 青海省市场监督管理局 XXXX - XX - XX 实施 发 布 DB63/ T XXXX—2021 前 言 本文件按照GB/T 1.1-2020 《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 本文件由青海省农业农村厅提出并归口。 本文件起草单位：青海湖裸鲤救护中心。 本文件主要起草人：祁洪芳、张清靖、杨建新、史建全、俞录贤、付生云、柴长凯、张宏、罗颖、 丰朝晖、周卫国、吴洪芳、汪洋、田少锋、闫丽婷、吴艳红、江华敏、魏昐昐、阿怀云、张涛。 本文件由青海省农业农村厅监督实施。 I DB63/ T XXXX—2021 青海湖裸鲤受精卵脱粘技术规范 1 范围 本文件规定了青海湖裸鲤受精卵脱粘的材料、方法和操作技术要求。 本文件适用于青海湖裸鲤受精卵的人工脱粘。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本 文件。 GB/T 19527 青海湖裸鲤繁育技术规程 GB/T 21444 青海湖裸鲤 DB63/T 986 青海湖裸鲤亲鱼 3 术语和定义 GB/T 21444界定的以及下列术语和定义适用于本文件。 3.1 受精卵 发育成熟的精子头部与卵膜成分接触诱发顶体反应，导致精子头部的顶体小泡释放水解酶，溶解卵 膜的胶状层和卵黄膜，形成孔道。精子通过孔道进入卵子，完成雄原核与雌原核的融合，形成受精卵。 3.2 粘性卵 卵膜表面具粘性，且能粘附在水草、沙砾、鱼巢等附着物上的鱼卵。 4 精、卵和受精卵的来源及特征 4.1 亲本的来源 捕捉产卵河道中自然繁殖的青海湖裸鲤亲鱼，依据DB63/T 986的规定，挑选发育良好、体质较优的 雌雄鱼，并获取发育成熟的精、卵。 4.2 精液采集及特征 轻压雄鱼腹部，流出乳白色精液，遇水呈云雾状散开，即为质量好的精液，遇水结块则为质量差的 精液。 1 DB63/ T XXXX—2021 4.3 成熟卵子采集及特征 轻压雌鱼腹部，排卵流畅，卵粒呈淡黄色，饱满、大小整齐、色泽鲜明、半透明、游离状态、有弹 性，即为质量好的卵；排卵不畅，卵粒结成块状且色泽暗淡，则为质量差的卵。 4.4 受精卵来源 依据GB/T 19527的规定获取受精卵。 5 脱粘剂材料、配制及用量 5.1 脱粘材料 脱粘材料为滑石粉（主要成分是硅酸镁）或黄泥浆。 5.2 脱粘剂配制 5.2.1 滑石粉脱粘剂配制 取40g滑石粉经80目筛绢过滤后，溶于1 L水中（或与水以1:25～1:30的比例混合），充分搅拌均匀 即可。 5.2.2 黄泥浆脱粘剂配制 将黄泥晒干充分捣碎后，与清水以1:10的比例混合并充分搅拌，并用80目筛绢过滤，除去杂质和砂 砾，滤出的泥浆呈浓水汤状即可。 5.3 脱粘剂用量 5.3.1 滑石粉脱粘剂用量 每10万粒受精卵使用滑石粉脱粘剂0.3 L，每次应根据受精卵数量来确定滑石粉溶液的用量。 5.3.2 黄泥浆脱粘剂用量 每10万粒受精卵使用黄泥浆脱粘剂1 L，每次应根据受精卵数量确定黄泥浆水的用量。 5.4 脱粘用具 搪瓷盆、量杯（1L） 、棉毛巾、羽毛、乳胶手套、筛绢（80目） 。 6 受精卵脱粘操作技术要求 6.1 脱粘前处理 受精卵脱粘前要进行下列处理。 a) 每 10 万粒受精卵加入 2 L 清水后使用羽毛顺时针方向匀速充分搅拌 2 min～3 min 后，待卵沉 淀 10 s； b) 将盛卵的容器缓慢倾斜倒出混浊液，并将漂浮于水面的浮沫搅拌开，将连结的卵粒、一些死卵， 以及多余的粘液一同倒出，必要时辅以羽毛进行拨除； c) 重复 2 次～3 次后可将多余的粘液和死卵基本清除掉，得到干净的受精卵。 2 DB63/ T XXXX—2021 6.2 脱粘操作 受精卵脱粘操作方法符合下列规则： a) 在经过脱粘前处理的受精卵中加入脱粘剂； b) 操作人员佩戴无菌乳胶手套，掌心垂直于容器底部，四指翘起并叉开，以每分钟 240 次的频率 左右搅动； c) 将所有的受精卵搅动起来，悬浮于脱粘液中为宜，连续搅动 15 s～25 s，静置 10 s 后，再将脱 粘液缓缓倒出容器； d) 重复清洗 2 次～3 次，直至将全部粘液洗净为止，即可得到脱粘处理后的受精卵。 _________________________________ 3