(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210360855.X (22)申请日 2022.04.07 (71)申请人 临沂大学 地址 276005 山东省临沂市兰山区双岭路 中段 (72)发明人 刘丽赏　陈晋荣　谢儒雯　朱科晓　 李娜　张书圣　 (74)专利代理 机构 北京高沃 律师事务所 1 1569 专利代理师 霍苗 (51)Int.Cl. C12Q 1/70(2006.01) C12N 15/11(2006.01) C12Q 1/6837(2018.01) (54)发明名称 一种核酸可视化检测的生物探针及试剂盒 和非诊断目的 的可视化检测核酸的方法 (57)摘要 本发明属于核酸检测技术领域， 提供了一种 核酸可视化检测的生物探针及试剂盒和非诊断 目的的可视化检测核酸的方法。 本发 明提供的核 酸可视化检测的生物探针为羧基修饰的特异性 识别核酸的寡核苷酸序列。 本发 明的生物探针中 的羧基能够诱导晶体颗粒形成， 使晶体颗粒代替 荧光素作为读取方式， 具有可视化、 成本低、 稳定 性高， 且不需要特殊仪器， 不依赖专业人员和专 业设备的优点。 权利要求书1页 说明书9页 序列表2页 附图3页 CN 115094162 A 2022.09.23 CN 115094162 A 1.一种核酸可视化检测的生物探针， 其特征在于， 所述生物探针为羧基修饰的特异性 识别核酸的寡核苷酸序列。 2.一种核酸可视化检测的试剂 盒， 其特征在于， 包括权利要求1所述的羧基修饰的特异 性识别核酸的寡核苷酸序列。 3.根据权利要求2所述的试剂盒， 其特征在于， 还包括马来酰亚胺基修饰的基板、 抑制 剂溶液、 捕获DNA溶 液、 洗涤剂、 氯化钙溶 液和碳酸铵。 4.根据权利要求3所述的试剂盒， 其特征在于， 所述抑制剂溶液中的抑制剂包括HS (CH2)11CH3、 BSA和HS(C H2)11N(CH3)3Cl中的一种或多种。 5.根据权利要求3或4所述的试剂盒， 其特 征在于， 所述抑制剂溶 液的浓度为10m mol/L。 6.根据权利 要求3所述的试剂盒， 其特征在于， 所述捕获DNA溶液中捕获DNA试剂为巯基 修饰的特异性识别核酸的寡核苷酸序列。 7.根据权利要求3或6所述的试剂盒， 其特征在于， 所述捕获DNA溶液的浓度为1nmol/L ～100pmol/L。 8.根据权利要求3所述的试剂盒， 其特征在于， 所述氯化钙溶液的浓度为2mmol/L～ 3mmol/L。 9.一种非诊断目的 的可视化检测核酸的方法， 其特 征在于， 包括以下步骤： 将捕获DNA溶液加入到马来酰亚胺基修饰的基板上， 孵育、 清洗和吹干， 得到含捕获DNA 基板； 将抑制剂溶液加入到所述含捕获DNA基板上， 孵育、 清洗和吹干， 得到含捕获DNA ‑抑制 剂基板； 将待测核酸样本加入到所述含捕获DNA ‑抑制剂基板上， 孵育、 清洗和吹干， 得到捕获有 核酸基板； 将含有羧基修饰的特异性识别核酸的寡核苷酸序列的溶液加入到所述捕获有核酸基 板上， 孵育、 清洗和吹干， 得到含有探针 基板； 将氯化钙溶液加入到所述含有探针基板上， 然后加入碳酸铵， 孵育、 清洗和吹干， 得到 含晶体基板； 对所述含晶体 基板进行 结晶点拍照， 得到结晶点个数； 将所述结晶点个数代入标准曲线方程中， 计算待测核酸样本中核酸的浓度。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115094162 A 2一种核酸可视化检测的生物探针及 试剂盒和非诊断目的 的可 视化检测核酸 的方法 技术领域 [0001]本发明涉及核酸检测技术领域， 尤其涉及 一种核酸可视化检测的生物探针及试剂 盒和非诊断目的 的可视化检测核酸的方法。 背景技术 [0002]核酸检测是鉴定新冠病毒的金标准， 随着疫情的爆发被广泛关注， 而核酸检测在 疾病诊断、 有害病毒细菌检测与法医应用等领域原本就是关键技术。 国内外现在使用的核 酸检测方法主要依赖荧光检测， 通过检测荧光信号的动态增长情况来判断核酸靶标的存 在。 但是， 荧 光检测依赖特殊的仪器， 很难应用于即时检测。 发明内容 [0003]有鉴于此， 本发明的目的在于提供一种核酸可视化检测的生物探针及试剂盒和非 诊断目的的可视化检测核酸的方法。 本发明提供 的生物探针能够诱导晶体颗粒形成， 使晶 体颗粒代 替荧光素作为信号读取方式， 具有 可视化、 成本低、 稳定性高， 且不需要 特殊仪器、 不依赖专业人员和专业设备的优点， 有望用于即时检测。 [0004]为了实现上述发明目的， 本发明提供以下技 术方案： [0005]本发明提供了一种核酸可视化检测的生物探针， 所述生物探针为羧基修饰的特异 性识别核酸的寡核苷酸序列。 [0006]本发明还提供了一种核酸可视化检测的试剂盒， 包括上述技术方案所述的羧基修 饰的特异性识别核酸的寡核苷酸序列。 [0007]优选地， 还包括马来酰亚胺基修饰的基板、 抑制剂溶液、 捕获DNA溶液、 洗涤剂、 氯 化钙溶液和碳酸铵。 [0008]优选地， 所述抑制剂溶液中的抑制剂包括HS(CH2)11CH3、 BSA和HS(CH2)11N(CH3)3Cl 中的一种或多种。 [0009]优选地， 所述抑制剂溶 液的浓度为10m mol/L。 [0010]优选地， 所述捕获DNA 溶液中捕获D NA为巯基修饰的特异性识别核酸的寡核苷酸序 列。 [0011]优选地， 所述捕获DNA溶 液的浓度为1nmo l/L～100pmol/L。 [0012]优选地， 所述氯化钙溶 液的浓度为2m mol/L～3mmol/L。 [0013]本发明还提供了一种非诊断目的 的可视化检测核酸的方法， 包括以下步骤： [0014]将捕获DNA溶液加入到马来酰亚胺基修饰的基板上， 孵育、 清洗和吹干， 得到含捕 获DNA基板； [0015]将抑制剂溶液加入到所述含捕获DNA基板上， 孵育、 清洗和吹干， 得到含捕获DNA ‑ 抑制剂基板； [0016]将待测核酸样本加入到所述含捕获D NA‑抑制剂基板上， 孵育、 清洗和吹干， 得到捕说　明　书 1/9 页 3 CN 115094162 A 3