(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210390496.2 (22)申请日 2022.04.14 (71)申请人 南昌大学第一附属医院 地址 330000 江西省南昌市永外正 街17号 (72)发明人 晏少颖　龚彬彬　 (74)专利代理 机构 北京科家知识产权代理事务 所(普通合伙) 11427 专利代理师 宫建华 (51)Int.Cl. C12Q 1/6886(2018.01) C12N 15/11(2006.01) (54)发明名称 生物标志物在HBV相关肝癌诊断及预后中的 应用 (57)摘要 本发明提供一种检测lncRNA的表达水平的 试剂在制备诊断HBV相关肝癌或预测HBV相关肝 癌预后的产品中的应 用， 所述lncRNA为 AC005332.5、 ELF3 ‑AS1和LINC00665， 该标志物组 合具有高特异性和灵敏度， 能够作为HBV相关肝 癌的有效诊断标记， 并且其表达水平与HBV相关 肝癌分期、 分级及总体存活率相关， 可应用于HBV 相关肝癌的预后判断。 权利要求书1页 说明书6页 序列表2页 附图3页 CN 114836538 A 2022.08.02 CN 114836538 A 1.检测lncRNA的表达水平的试剂在制备诊断HBV相关肝癌或预测HBV相关肝癌预后的 产品中的应用， 其特 征在于， 所述 lncRNA为AC 005332.5、 ELF3 ‑AS1和LINC00665。 2.根据权利要求1所述的应用， 其特征在于， 所述产品包括通过PCR、 原位杂交、 或高通 量测序平台检测所述 lncRNA表达水平的试剂。 3.根据权利 要求1所述的应用， 其特征在于， 所述试剂包括特异性针对所述lncRNA的探 针或引物。 4.根据权利要求3所述的应用， 其特 征在于， 所述引物序列为： 所述AC005332.5的正向引物为AGA ACCCTGGACCCTAGCATTGG； 所述AC005332.5的反向引物为TAGC CACTCGCACATC CTCCTC； 所述ELF3 ‑AS1的正向引物为； CA AAGTGCCGAGATTAG； 所述ELF3 ‑AS1的反向引物为； ACACG GTTATGGACTG； 所述LINC00665的正向引物为； G GTGCAAAGTGGGAAGTGTG； 所述LINC00665的反向引物为CG GTGGACGGATGAGAAACG。 5.根据权利要求1 ‑4中任一项所述的应用， 其特 征在于， 所述产品包括芯片或试剂盒。 6.根据权利要求1 ‑4中任一项所述的应用， 其特征在于， 利用所述产品检测受试者样本 中的AC005332.5、 ELF3 ‑AS1和LINC00665的表达水平， 与正常人相比， 受试者样本中的 AC005332.5、 ELF3 ‑AS1和LINC00665的表达水平上调， 则诊断该受试者为HBV相关肝癌患 者 或HBV相关肝癌预后不良。 7.根据权利要求6所述的应用， 其特 征在于， 所述样本为血清。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 114836538 A 2生物标志物在HBV相关肝癌诊断及预后中的应用 技术领域 [0001]本发明涉及医学生物检测技术领域， 具体地说， 涉及血清标志物在HBV相关肝癌的 诊断及预后判断中的应用。 背景技术 [0002]原发性肝细胞肝癌 （Hepat ocellular  carcinoma， HCC， 以下简称肝癌） 是临床最常 见的恶性肿瘤之一， 近年来其致死率已跃居恶性肿瘤中的第三位， 严重威胁着人类的生命 健康。 乙型肝炎病毒 （hepatitis  B virus， HBV） 被认为是肝癌进展的关键危险因素， 甚至是 主要的病因。 虽然治疗手段如手术、 移 植和射频消融术有了进步， 但由于肿瘤的高侵袭性和 复发率， HBV相关的肝癌患者的总体生存率仍较低。 且对于大多 数HBV相关的肝癌患者， 在 诊 断时已经进展到中晚期， 已出现局部肿瘤侵犯血管， 及淋巴结和远处转移， 丧失手术机会。 目前， 组织活检和病理检查是肝癌诊断的 “金标准”， 然而由于其有创性， 临床应用有限。 而 临床上使用最广泛的肝癌血清标志物是AFP， 但是随着AFP阴性患者的增多， 肝癌患者漏检 增多， 直接影响肝癌患者的早期诊断和预后评价。 因此寻找更有效的、 敏感的HBV相关的肝 癌诊断和预后相关的新型 无创标志 物具有重要意 义。 [0003]长链非编码RNA （Long  non‑coding RNA， lncRNA） 是长度超过200个核苷酸的非编 码RNA， 在基因组转录过程中广泛存在， 曾被认 为不具有任何生物学功能， 作为RNA聚合 酶II 转录的副产物， 被称为是基因组转录的 “暗物质”， 但随着这些年以来分子生物学技术的不 断发展和进步， 现有越来越多的研究发现， 这些之前所谓的基因组 “暗物质”可调控细胞分 化、 细胞凋亡等多种生物学过程， 并在癌症的发生 发展中发挥重要作用。 而lncRNA与肿瘤之 间关系的研究多使用的组织标本。 组织标本的获取为有创过程， 获取病变部位不一定准确， 不适合早期诊断， 也不适用于高危人群的筛查。 血清标本采集简便， 创伤性小， 而且可以同 时获得多个肿瘤相关指标。 因此可以研究血液标本中lncRNA与肿瘤发生发展的关系。 由于 肝癌的发生发展过程中涉及复杂的病理改变， 因此进一步探索lncRNA与HBV相关肝癌的关 系， 建立lncRNA分子联合检测模型对了解HBV相关肝癌的发生发展及诊断预后具有重大意 义。 发明内容 [0004]为了克服现有技术的缺陷， 本申请发明人经过研究， 从大批 的癌症标志物中筛选 得到了可潜在应用于HBV相关肝癌诊断及预后判断的标志物组合， 所述标志物组合是 AC005332.5、 ELF3 ‑AS1和LINC00665。 本发明惊奇地发现， 该标志物组合具有高特异性和灵 敏度， 能够作为HBV相关肝癌的有效诊断标记， 并且其表达水平与HBV相关肝癌分期、 分级及 总体存活率相关， 可应用于 HBV相关肝癌的预后判断。 [0005]本发明提供如下技 术方案： 本发明提供了一种诊断HBV相关肝癌或预测HBV相关肝癌预后的产品， 所述产品包 括检测AC 005332.5、 ELF3 ‑AS1和LINC00665的表达水平的试剂。说　明　书 1/6 页 3 CN 114836538 A 3