(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210422869.X (22)申请日 2022.04.21 (71)申请人 中山大学附属第一医院 地址 510000 广东省广州市中山 二路58号 (72)发明人 李家平　温杰　张晓凯　 (74)专利代理 机构 广州一锐专利代理有限公司 44369 专利代理师 杨昕昕 (51)Int.Cl. C12Q 1/6886(2018.01) C12N 15/11(2006.01) (54)发明名称 一种新的肝癌肿瘤标志 物及其应用 (57)摘要 本发明涉及一种新发现肝癌肿瘤标志物及 其临床检测相关应用， 本发明所述的肝癌肿瘤标 志物为OIT3， 在肝癌组织中存在着异常低表达状 态， 此标志物可以应用在肝癌的诊断及治疗领域 中， 此外， 本发明中还涉及到OIT3作为肝癌标志 物的引物序列， 可 以作为肝癌诊断试剂， 应用在 肝癌的检测诊断领域当中。 本发 明可以为提高肝 癌诊断的精准性、 效率及早期诊断水平， 适合在 临床肝癌诊断工作上进行推广。 权利要求书1页 说明书7页 附图4页 CN 114717320 A 2022.07.08 CN 114717320 A 1.一种新的肝癌肿瘤标志物， 其特征在于， 所述肝癌肿瘤标志物为OIT3； 所述OIT3在肝 癌患者外周血及肝癌组织中的表达水平采用qRT ‑PCR的方法进行检测； 其中OIT3在肝癌组织中处于显著低表达状态， 且与肝癌细胞的肿瘤生物学行为密切相 关。 2.根据权利要求1所述的一种新的肝癌肿瘤标志物， 其特征在于， 所述肿瘤生物学行为 为增殖、 迁移和侵 袭。 3.根据权利要求2所述一种新的肝癌肿瘤标志物， 其特征在于， 所述肝癌肿瘤标志物 OIT3在肝癌组织中处于低表达状态， 且其表达水平与肝癌 患者的临床预后显著相关。 4.根据权利要求1所述一种新的肝癌肿瘤标志物， 其特征在于， 所述标志物可通过设计 引物序列作为肝癌检测试剂盒的关键组分之一， 并对肝癌患者临床样本进 行该肿瘤标志物 的检测。 5.根据权利要求4所述一种新的肝癌肿瘤标志物， 其特征在于， 所述临床样本包括外周 血及肝癌组织标本， 应在临床上进行相关样本的收集， 其中外周血样本的收集 程序如下： 研究对象空腹静脉血2.5 ‑3.5 mL于促凝管中， 室温垂直静置25 ‑35min后， 常温下1450 ‑ 1550 r/min离心8‑12 min， 吸取上层液体至标记好的EP管中， ‑80℃保存备用。 6.根据权利要求5所述的一种新的肝癌肿瘤标志物， 其特征在于， 所述肝癌标本的收集 程序如下： 切取新鲜肝癌组织保存于 ‑80℃， 以备后续用TRIzol试剂进行各血清样 本及肝癌 组织样本总RNA的提取。 7.根据权利要求6所述的一种新的肝癌肿瘤标志 物， 其特征在于， 所述OIT3引物序列： ForwardPrimer： TGT TCTGCTTACATCAGC CTG; Reverse Primer： GT TGTCACATAGAG GAGGACCT； 根据引物采用荧光定量PCR （qRT ‑PCR） 对患者的肝癌组织及外周血标本进行OIT3表达 水平的检测。 8.根据权利要求1所述的一种新的肝癌肿瘤标志物， 其特征在于， 所述肝癌肿瘤标志物 在作为肝癌检测诊断试剂中的应用及临床预后预测模型中的价 值。 9.一种如权利要求1 ‑8任一项所述 肝癌肿瘤标志 物的检测在肝癌诊断中的应用。 10.根据权利要求9所述的应用可根据OIT3的表达水平对肝癌患者进行早期筛选并进 行临床预后的预测指标， 具有临床转 化价值。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 114717320 A 2一种新的肝癌肿瘤标志物及其应用 技术领域 [0001]本发明涉及肝癌肿瘤技 术领域， 具体涉及一种新的肝癌肿瘤标志 物及其应用。 背景技术 [0002]肝癌的发病率高居全球癌症发病率第5位， 肝癌的致死率高居癌症相关死亡率的 第二位， 每年新诊断的肝癌病例为854， 000例 左右， 每年因肝癌死亡病例数达到810,000例。 其中在全球新诊断的肝癌病例中， 超过90%的都是肝细胞癌。 其中， 亚洲地区的新诊断病例 数的比例高达75 ‑80%， 尤其是我国， 我国肝癌的新诊断病例数占亚洲总病例数的50%以上。 肝癌患者的防治以早发现早治疗最为关键， 因为早期缺 乏明显的不适症状， 大多数患者并 不能及时发现早期病变， 当出现明显临床症状时， 已经处于晚期， 肝功能差， 并丧失了手术 机会。 目前， 肝癌的诊断主 要依靠影 像学和血清 AFP （甲胎蛋白） 水平的检测。 [0003]但是影像学检查手段对于小于2厘米的肝癌病灶的敏感性较差， 这与其肿瘤血管 结构不完整有关。 自20世纪70年代以来， 血清AFP检测已经开始用于临床肝癌诊断， 可以提 高诊断准确性， 尤其对于已有临床症状的晚期肝癌患者。 AFP检测手段可以提供39 ‑64%的敏 感性及76 ‑91%的特异性， 即使在早期肝癌的诊断中， AFP检测也能提供一定的价值。 目前， AFP检测已经在临床上广泛用于肝癌的诊断。 但是， 仍有8 0%小肝癌患者其外周血AFP并没有 显著变化， 对于 ＞3 cm的肝癌的诊断， AFP检测的敏感性可以达到52%， 但对于＜3  cm的肝癌 的诊断， AFP检测的敏感性仅为25%。 且存在着部分AFP阴性 （<  25 ng/ml） 的肝癌患者。 此外， AFP的显著升高也可见于非肝癌病人， 如患有急性肝炎的患者。 总而言之， 对于肝癌的诊断， 我们仍需要更为精确灵敏， 更 可信且可以广泛应用的诊断指标。 [0004]肝癌的治疗主要以手术为主， 早期的肝癌患者可以采用外科手术治疗等方法， 其5 年生存率可以达到70%， 而晚期的患者只能进行保守治疗， 其临床预后差， 中位生存时间少 于1年。 对于中晚期的患者， 还需要多学科综合治疗， 如介 入栓塞、 局部消融、 局部放疗等， 即 使经过多学科治疗， 肝癌患者的长期预后仍然很差， 且肝癌术后复发率高， 复发进程较早， 且无特异性的疗法， 靶向及 免疫治疗能带来一定的临床获益， 却 仍不能达到更高的治疗效 率。 上述情况迫使我们需要对肝癌的发生发展、 侵袭转移、 放化疗抵抗、 复发等过程中所涉 及信号调控通路等分子生物学基础进行研究， 从而发掘新的肝癌肿瘤标志物， 为肝癌的早 期诊断、 预后判断等 提供新的思路， 提高我国的肝癌诊疗水平。 [0005]基于此， 本发明提供一种新的肝癌肿瘤标志 物及其应用。 发明内容 [0006]针对现有技术的缺陷， 本发明的目的是提供一种新的肝癌肿瘤标志物及其应用， 以解决上述背景技 术中提出的问题。 [0007]本发明解决技 术问题采用如下技 术方案： 本发明提供了一种新 的肝癌肿瘤标志物， 所述肝癌肿瘤标志物为OIT3； 所述OIT3 在肝癌患者外周血及肝癌组织中的表达水平采用qRT ‑PCR的方法进行检测；说　明　书 1/7 页 3 CN 114717320 A 3