(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210423974.5 (22)申请日 2022.04.21 (71)申请人 扬州大学 地址 225009 江苏省扬州市大 学南路88号 (72)发明人 张跟喜　张晋　吴鹏飞　王麒帆　 凌暄泽　金崇富　叶红心　张丽　 李培峰　魏清宇　张涛　戴国俊　 谢恺舟　 (74)专利代理 机构 南京苏高专利商标事务所 (普通合伙) 32204 专利代理师 王艳 (51)Int.Cl. C12Q 1/6888(2018.01) C12Q 1/686(2018.01) C12N 15/11(2006.01) (54)发明名称 lncRNA TRSMD在鸡骨骼肌生长发育中的应 用 (57)摘要 本发明公开了lncRNA  TRSMD在调控鸡骨骼 肌生长发育速度或加快鸡育种过程中生长性能 指标的快速改良中的应用， 本发 明还公开了检测 lncRNA TRSMD在鸡肉组织表达量的特异性引 物 对。 本发明还公开了检测试剂盒及其检测方法。 本发明提供的特异性引物对和检测试剂盒可用 于检测lncRNA  TRSMD在鸡肌肉组织的表达量， 检 测方法简单快捷， 本发明提供的lncRNA  TRSMD可 作为检测鸡生长速度的一种标志物， 在育种中通 过检测20胚龄腿肌组织中lncRNA  TRSMD的表达 量， 能够快速判断其生长速度的快慢， 选留与检 测个体具有全同胞关系的个体， 加快鸡育种过程 中生长性能指标的快速改良。 权利要求书1页 说明书4页 序列表1页 附图2页 CN 114990225 A 2022.09.02 CN 114990225 A 1.lncRNA  TRSMD在调控鸡骨骼肌生长发育速度或加快鸡育种过程中生长性能指标的 快速改良中的应用。 2.用于检测lncRNA  TRSMD在鸡肉组织表达量的特异性引物对， 其特征在于， 所述特异 性引物对序列如SEQ  ID NO: 1和SEQ ID NO: 2所示。 3.权利要求2所述的特异性引物对在制备检测鸡肌肉组织中的lncRNA  TRSMD表达量的 试剂或试剂盒中的应用。 4.一种荧光定量检测试剂 盒， 其特征在于， 所述试剂 盒包括权利要求2所述的特异性引 物对。 5.根据权利要求4所述的荧光定量检测试剂 盒， 其特征在于， 所述荧光定量检测试剂 盒 还包括Premix试剂和无酶双蒸水组成。 6.根据权利要求4所述的荧光定量检测试剂 盒， 其特征在于， 所述荧光定量检测试剂 盒 还包括内参基因β ‑actin的引物对， 所述内参基因β ‑actin的引物对序列如SEQ  ID NO: 3和 SEQ ID NO: 4所示。 7.权利要求2所述的特异性引物对或权利要求4  ~ 6任一项所述的荧光定量检测试剂 盒在研究或调控鸡骨骼肌生长发育 速度中的应用。 8.根据权利要求7所述的应用， 其特征在于， 所述应用为通过荧光定量PCR检测鸡肌肉 组织中lncRNA TRSMD的表达量。 9.权利要求4  ~ 6任一项所述的检测试剂 盒的检测方法， 其特征在于， 具体方法为通过 荧光定量PCR检测l ncRNA TRSMD在鸡胚肌肉组织中的表达量。 10.根据权利要求9所述的检测方法， 其特征在于， 所述荧光定量PCR反应体系为： Premix试剂、 权利要求2所述的引物对、 模板 cDNA和无酶双蒸水。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 114990225 A 2lncRNA TRSMD在鸡骨骼肌生长发育中的应用 技术领域 [0001]本发明属于生物工程领域， 具体涉及lncRNA  TRSMD在鸡骨骼肌生长发育中的应 用。 背景技术 [0002]我国地方鸡遗传资源丰富， 地方鸡具有肉质好、 抗逆性强等优点， 但其生长速度缓 慢、 饲料利用率低， 缺乏市场竞争力， 难以产业化， 各项生长性能指标亟待提高。 长链非编码 RNA(lncRNA)是指长度大于200nt的单链非编码RNA， 广泛存在于真核生物体内， 它 作为非编 码RNA的重要 一员， 能够通过MREs(microRNA  response elements， MREs)竞争性结合 miRNA， 导致下游靶基因表达水平改变， 最终达 到调控的目的。 [0003]lncRNA通过该途径参与了多种复杂的生物学调控过程， 在骨骼肌生长 发育中也同 样发挥着重要作用。 转录组测序技术是一种应用较广泛的高通量测序技术， 能够准确、 快 速、 大量挖掘与表型相关的基因以及非编码RNA。 发明内容 [0004]发明目的： 本发明所要解决的技术问题是通过转录组测 序技术筛选与鸡骨骼肌生 长发育相关的lncRNA， 最终在20胚龄腿肌组织中筛选得到了lncRNA  TRSMD， 该lncRNA能够 反应鸡骨骼肌生长发育速度快慢， 通过选留与检测个体具有全同胞关系的个体， 加快鸡育 种过程中生长性能指标的快速的改良， 因此该lncRNA  TRSMD能够用于调控鸡骨骼肌生长发 育速度或加快鸡育种过程中生长性能指标的快速改良。 [0005]本发明还要解决的技 术问题是提供了用于检测的特异性引物对。 [0006]本发明还要解决的技 术问题是提供了一种检测试剂盒及其检测方法。 [0007]本发明最后要解决的技术问题是提供了所述的特异性引物对、 所述的检测试剂盒 在对鸡胚胎期骨骼肌生长发育的调控作用中的应用。 [0008]技术方案： 为了解决上述技术问题， 本发明提供了lncRNA  TRSMD在调控鸡骨骼肌 生长发育 速度中的应用。 [0009]本发明内容还包括用于检测lncRNA  TRSMD在鸡肉组织表达量的特异性引物对， 所 述特异性引物对序列如SEQ  ID NO： l和SEQ  ID NO： 2所示。 [0010]本发明内容还包括所述的特异性引物对在制备检测鸡肌肉组织中的lncRNA   TRSMD表达量的试剂或试剂盒中的应用。 [0011]本发明内容还包括一种荧光定量检测试剂盒， 所述试剂盒包括所述的特异性引物 对。 [0012]进一步地， 所述荧光定量检测试剂盒还 包括Premix试剂和无酶双蒸水组成。 [0013]进一步地， 所述荧光定量检测试剂盒还包括内参基因β ‑actin的引物对， 所述内参 基因β‑actin的引物对序列如SEQ  ID NO： 3和SEQ  ID NO： 4所示。 [0014]本发明内容还包括所述的特异性引物对或所述的荧光定量检测试剂盒在研究或说　明　书 1/4 页 3 CN 114990225 A 3