(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210435274.8 (22)申请日 2022.04.24 (66)本国优先权数据 202210202776.6 202 2.03.02 CN (71)申请人 中国水产科 学研究院黄海水产研究 所 地址 266000 山东省青岛市 市南区南京路 106号 (72)发明人 隋娟　栾生　孔杰　代平　孟宪红　 罗坤　曹家旺　谭建　陈宝龙　 (74)专利代理 机构 青岛合创知识产权代理事务 所(普通合伙) 37264 专利代理师 王晓晓 (51)Int.Cl. C12Q 1/6888(2018.01)C12N 15/11(2006.01) C12Q 1/6872(2018.01) (54)发明名称 一种凡尔纳对虾分子标记及其引物和应用 (57)摘要 本发明提供了一种凡尔纳对虾分子标记及 其引物和应用。 所述分子标记7W2的核苷酸序列 如SEQ ID No.1所示， 其中在凡纳滨对虾高繁殖 力群体中， 第301位的碱基为C， 且等位基因频率 ≥7.14%。 本发明还提供了 所述的分子 标记7W2的 引物， 包括核苷酸序列如SEQ  ID No.2和SEQ  ID  No.3所示的扩增引物以及核苷酸序列如SEQ  ID  No.4所示的延伸引物。 凡纳滨对虾高繁殖力分子 标记7W2可以不受生长阶段的限制， 能够用于凡 纳滨对虾 早期选育， 快速选育出繁殖性状优良的 亲本群体， 促进凡纳滨对虾高繁殖力新品种的选 育进程。 权利要求书1页 说明书6页 序列表2页 附图1页 CN 114752685 A 2022.07.15 CN 114752685 A 1.一种凡纳滨对虾分子标记7W2， 其特征在于， 所述分子标记7W2的核苷酸序列如SEQ   ID No.1所示。 2.根据权利要求1所述的分子标记7W2， 其特征在于， 在凡纳滨对虾高繁殖力群体 中， 所 述分子标记7W2的第3 01位碱基为C 。 3.根据权利要求2所述的分子标记7W2， 其特征在于， 所述分子标记7W2的碱基C在凡纳 滨对虾高繁殖力群 体中的等 位基因频率> 7%。 4.权利要求1所述的分子标记7W2的引物， 其特征在于， 所述引物包括核苷酸序列如SEQ   ID No.2和SEQ ID No.3所示的扩增引物以及核苷酸序列如SEQ  ID No.4所示的延伸引物。 5.权利要求1所述的分子标记7W2或者权利要求4所述的分子标记7W2的引物在用于筛 选具有高繁殖力的凡纳滨 对虾群体中的应用。 6.根据权利要求5所述的应用， 其特征在于， 筛选具有高繁殖力的凡纳滨对虾群体的具 体步骤为： 提取凡纳滨对虾群体内测试样品的DNA， 并将其作为模板， 利用所述引物进行飞 行质谱分型， 若分型结果中分子标记的第300位的碱基为C， 且等位基因频率>7%， 则选择该 凡纳滨对虾群体作为培 育凡纳滨 对虾高繁殖力的亲本 。 7.根据权利要求6所述的应用， 其特征在于， 所述凡纳滨对虾群体测试样品的数量在30 尾以上。 8.根据权利要求6所述的应用， 其特征在于， 在飞行质谱分型中， PCR扩增的条件为预变 性94℃ 3min； 变性94℃  30s， 退火56℃  25s， 延伸72℃  30s， 共重复40个循环； 最后延伸72 ℃ 4min； 4℃保存。 9.根据权利要求5所述的应用， 其特征在于， 在飞行质谱分型中， 延伸反应的条件为预 变性94°C 30 s； 变性94 °C 5s， 退火52 °C 5s， 延伸80 °C 5s， 共重复40个循环； 最后延伸72 °C  3min； 4°C保存。 10.权利要求1所述的分子标记7W2在凡纳滨对虾遗传多样性分析、 种质鉴定和遗传图 谱构建中的应用。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 114752685 A 2一种凡尔纳对虾分子标记及其引物和应用 技术领域 [0001]本发明属于水产动 物分子标记辅助育种领域， 具体涉及 一种凡尔纳对虾 分子标记 及其引物和应用。 背景技术 [0002]凡纳滨对虾(Penaeus  vannamei)又称南美白对虾、 太平洋白虾， 隶属于节肢动物 门(Arthropoda)、 甲壳纲(Crustaeea)、 十足目(Deeapoda)、 对虾科(Penaeidae)、 对虾属 (Penaeus)， 是我国和世界养殖产量最高的对虾种类， 也是单一产值最高的水产养殖种类之 一。 2020年我国养殖产量超过180万吨， 产值超过700亿元， 约占世界总产量的40％。 我国每 年种虾需求量超过100万对， 苗种需求量超过1.5万亿尾。 凡纳滨对虾具有产卵量高， 可多次 产卵的特性。 然而在苗种生产中， 雌虾的繁殖能力存在巨大个体差异。 在一个生产周期 中， 部分雌虾从未产卵， 而有的雌虾能够 多次产卵。 培育高繁殖力(产卵和产卵量)新品种， 对于 提高育苗效率， 节省生产成本具有重要意义。 繁殖性状属中低遗传力性状， 传统的育种方法 进展缓慢， 借助分子标记辅助育种技 术可有效加快选 育进程。 [0003]作为第三代分子标记， 单核苷酸多态性标记(SNP)具有丰富度高、 密度大、 稳定性 强、 共显性等特点， 成为目前虾、 蟹等经济甲壳动物中应用最广泛的分子标记 技术。 目前， 有 关凡纳滨对虾繁殖相关SNP标记的开发较少， 并且产业中缺 乏可应用于分子标记辅助育种 的标记。 因此， 开发高繁殖力的分子标记对凡纳滨 对虾的新品种培 育具有重要意 义。 发明内容 [0004]本发明提供了一种凡尔纳对虾分子标记及其引物和应用。 分子标记7W2能够用于 凡纳滨对虾高繁殖力群 体的筛选中， 其鉴定效率及准确率高。 [0005]为实现上述发明目的， 本发明采用以下技 术方案予以实现： [0006]本发明提供了一种凡尔纳对虾分子标记7W2， 所述分子标记7W2的核苷酸序列如 SEQ ID No.1所示。 [0007]进一步的， 在凡纳滨 对虾高繁殖力群 体中， 所述分子标记7W2的第3 01位碱基为C 。 [0008]进一步的， 所述分子标记7W2的碱基C在凡纳滨对虾高繁殖力群体中的等位基因频 率>7％。 [0009]优选的， 所述分子标记7W2的碱基C在凡纳滨对虾高繁殖力群体中的等位基因频率 ≥7.14％。 [0010]本发明还提供了所述 的分子标记7W2的引物， 所述引物包括核苷酸序列如SEQ  ID  No.2和SEQ ID No.3所示的扩增引物以及核苷酸序列如SEQ  ID No.4所示的延伸引物。 [0011]本发明还提供了所述的分子标记7W2或者所述的分子标记7W2的引物在用于筛选 具有高繁殖力的凡纳滨 对虾群体中的应用。 [0012]进一步的， 筛选具有高繁殖力的凡纳滨对虾群体 的具体步骤为： 提取凡纳滨对虾 群体内(家系、 品系或地理群体)测试样品的DNA， 并将其作为模板， 利用所述引物进行飞行说　明　书 1/6 页 3 CN 114752685 A 3