(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210518487.7 (22)申请日 2022.05.12 (71)申请人 山西农业大 学 地址 030031 山西省太原市小店区龙城大 街81号 申请人 山西省畜牧技 术推广服 务中心 (72)发明人 史明月　路畅　刘巧霞　曹果清　 杨帅　李文霞　张燕伟　员佳乐　 杨阳　蔡春波　高鹏飞　李步高　 (74)专利代理 机构 北京路浩知识产权代理有限 公司 11002 专利代理师 黄爽 (51)Int.Cl. C12N 15/113(2010.01) C12Q 1/6888(2018.01)C12N 15/11(2006.01) C12Q 1/6851(2018.01) (54)发明名称 与猪骨骼肌卫星细胞增殖相关的IncRNA及 其应用 (57)摘要 本发明提供一种与猪骨骼肌卫星细胞增殖 相关的IncRNA及其应用。 本发明基于 前期转录组 测序数据， 发现IncRNA  Loc106505926随日龄的 增长其表达量极显著下降， 通过PCR试验证明 Loc106505926客观存在； 进 一步通过实时荧光定 量PCR及EdU染色试验验证了Loc106505926在猪 骨骼肌卫星细胞增殖过程中的作用， 发现干扰 Loc10650592 6后增殖标志基因PCNA、 Ki67等 极显 著降低， 阳性细胞数极显著减少。 本发明提出 Loc106505926可作为生物标志物用于鉴定猪骨 骼肌卫星细胞的增殖情况， 为肌肉生长发育的研 究提供新思路。 权利要求书1页 说明书6页 序列表5页 附图3页 CN 115161318 A 2022.10.11 CN 115161318 A 1.与猪骨骼肌卫星细胞增殖相关的IncRNA， 其特征在于， 所述IncRNA对应 的cDNA序列 如SEQ ID NO:1所示。 2.权利要求1所述IncRNA作为猪骨骼肌卫星细胞增殖的标志物在制备用于鉴定猪骨骼 肌卫星细胞增殖的检测试剂或试剂盒中的应用。 3.用于检测权利要求1所述IncRNA的引物， 其特征在于， 包括如SEQ  ID NO:2所示的上 游引物和如SEQ  ID NO:3所示的下游引物。 4.用于鉴定猪骨骼肌卫星细胞增殖的试剂盒， 其特征在于， 所述试剂盒包括用于检测 权利要求1所述 IncRNA表达水平的试剂。 5.根据权利要求4所述的试剂盒， 其特征在于， 所述试剂盒包括SEQ  ID NO:2‑3所示引 物。 6.权利要求1所述IncRNA的抑制剂， 其特征在于， 所述抑制剂为SEQ  ID NO:8‑9、 SEQ ID  NO:10‑11或SEQ ID NO:12‑13所示的siRNA， 或者上述 三对siRNA的组合。 7.一种鉴定猪骨骼肌卫星细胞增殖效率的方法， 其特征在于， 所述方法包括： 检测猪骨 骼肌卫星细胞中权利要求 1所述IncRNA的相对表达水平， 与对照组相比， 若所述IncRNA的相 对表达水平低， 则表明猪骨骼肌卫星细胞增殖效率低。 8.根据权利要求7所述的方法， 其特征在于， 利用SEQ  ID NO:2‑3所示引物检测所述 IncRNA的表达水平。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115161318 A 2与猪骨骼肌卫星细胞增殖相关的IncRNA及其应用 技术领域 [0001]本发明涉及分子遗传技术领域， 具体地说， 涉及一种与猪骨骼肌卫星细胞增殖相 关的IncRNA及其应用。 背景技术 [0002]骨骼肌是哺乳动 物体内最丰富的组织， 除了负责机体的运动， 还具有产生热量、 储 存蛋白质、 支持和保护软组织等功能。 作为 维持机体运转的重要器官之一， 骨骼肌与畜禽的 产肉量以及改善肉品质等经济性状密切相关。 骨骼肌的发育过程复杂， 受多种因子的调控， IncRNA是其中的重要调节因子 。 [0003]作为非编码RNA中的重要成员， Inc RNA广泛存在 于多种生物体内， 其功能涉及 到细 胞生命活动和个体发育等各个方面。 IncRNA是一类在真核生物体内主要由RNA聚合酶 Ⅱ指 导转录而成并且长度大于200nt的ncRNA， 大部分IncRNA表现出与 mRNA相似的结构特点， 其 序列中含有启动子、 外显子和内含子， 5 ′端和3′端经过加工和修饰后有5 ′帽子和3′polyA 尾， IncRNA序列保守性较低， 只有约12％的人基因组编码的IncRNA可以在其它生物中找到， 许多IncRNA都具有保守的二级结构， 一定的剪切形式以及亚细胞定位； 同时IncRNA的表达 也具有时空特异性。 这种保守性和特异性表明它 们是具有功能的。 [0004]根据IncRNA在基因组上相对于蛋白编码基因的位置， 可以将其分为反义型 IncRNA、 基因间型IncRNA、 发散型IncRNA、 增强子型IncRNA， 内含子型IncRNA这5种类型。 近 年的研究表明， IncRNA能在表观遗传、 转录及转录后水平上等多个层次调控基因的表达， 表 观遗传学层面是通过染色质重塑、 DNA甲基化和组蛋白修饰等方法， 使基因功能发生改变； 转录水平调控 是IncRNA可以通过调节相 邻基因的转录、 调节转录因子、 与DNA形成三螺旋复 合物等形式进行基因调控； 在转录后水平上， IncRNA除了能与剪接因子相互作用影响pre ‑ mRNA的剪接或与靶mRNA碱基特异性互补配对形成双链结构来调控基因以外， 还能作为 ceRNA竞争性结合miRNA来调控基因的表达。 除此之外， IncRNA还参与了X染色体沉默、 基因 组印记、 胚胎发育、 脂肪代谢调控、 骨骼肌生长发育以及染色质修饰等重要的调控过程。 目 前IncRNA的调控作用研究多集中在 小鼠等模式动物上， 猪骨骼肌中IncRNA的功能及其调控 机制还需进一 步探究。 发明内容 [0005]本发明的目的是提供一种与猪骨骼肌卫星细胞增殖相关的I ncRNA及其应用。 [0006]为了实现本发明目的， 第一方面， 本发明提供一种与猪骨骼肌卫星细胞增殖相关 的IncRNA(Loc106505926)， 所述 IncRNA对应的cDNA序列如SEQ  ID NO:1所示。 [0007]第二方面， 本 发明提供所述Inc RNA作为猪骨骼肌卫星细胞增殖的标志物在制备用 于鉴定猪骨骼肌卫星细胞增殖的检测试剂或试剂盒中的应用。 [0008]第三方面， 本发明提供一对用于检测所述IncRNA的引物， 包括如SEQ  ID NO:2所示 的上游引物和如SEQ  ID NO:3所示的下游引物。说　明　书 1/6 页 3 CN 115161318 A 3