ICS 07.080 CCS B47 43 湖南 省地方 标准 DB 43/T 2587—2023 蚕砂中氯霉素残留量的测定 液相色谱－串 联质谱法 Determination of chloramphenicol residues in silkworm excrement －liquid chromatography- tandem mass spectrometry method 2023 - 04 - 10发布 2023 - 07 - 10实施 湖南省市场监督管理局 发布 DB 43/T 2587 —2023 I 目次 前言............................................................................... III 1 范围 .............................................................................. 1 2 规范性引用文件 .................................................................... 1 3 术语和定义 ........................................................................ 1 4 方法提要 .......................................................................... 1 5 试剂与材料 ........................................................................ 1 6 仪器与设备 ........................................................................ 2 7 试样的制备与保存 .................................................................. 2 8 分析测定 .......................................................................... 2 9 结果计算 .......................................................................... 4 10 测定方法的线性范围、灵敏度、准确度、精密度 ........................................ 5 附录A（资料性） 氯霉素及其同位素内标的液相色谱- 串联质谱图 ............................ 6 DB 43/T 2587 —2023 III 前言 本文件按照 GB/T 1.1 —2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利，本文件的发布机构不承担识别专利的责任。 本文件由湖南省农业厅提出。 本文件由湖南省农业标准化技术委员会归口。 本文件主要起草单位：长沙海关技术中心。 本文件主要起草人：焦艳娜、梁香、齐鹤鸣、朱绍华、尹雪花、彭争光、唐会智、肖中宁。 DB 43/T 2587 —2023 1 蚕砂中氯霉素残留量的测定 液相色谱－串联质谱法 1 范围 本文件规定了蚕砂中氯霉素残留量的液相色谱- 串联质谱测定方法。 本文件适用于蚕砂中氯霉素残留量的测定。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。 其中， 注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本 文件。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 3 术语和定义 本文件没有需要界定的术语和定义。 4 方法提要 蚕砂中氯霉素用乙酸乙酯提取， GCB和C18固相萃取柱净化，液相色谱 -串联质谱仪测定，内标法定 量。 5 试剂与材料 除另有规定外，所有试剂均为分析纯，水为符合 GB/T 6682 规定的一级水。 试剂 5.1.1 乙酸乙酯（ C4H8O2）：色谱纯。 5.1.2 甲醇（CH3OH）：色谱纯。 5.1.3 无水硫酸镁（ MgSO4）。 5.1.4 氯化钠（ NaCl）。 标准品 5.2.1 氯霉素（ CAP，Chloramphenicol ，CAS号：56-75-7）：纯度≥98%。 5.2.2 内标：氘代氯霉素（ CAP-D5，Chloramphenicol D5， CAS号：202480-68-0）：纯度≥98% 。 标准溶液制备 5.3.1 氯霉素标准储备溶液（ 100μg/mL ）：精密称取氯霉素标准品 10mg（精确到 0.1 mg），用甲醇 溶解并稀释定容 100mL容量瓶中，制成浓度为 100μg/mL的标准储备溶液。－18 ℃保存，有效期 1年。 5.3.2 内标储备溶液（ 100μg/mL）：精密称取氘代氯霉素 10mg（精确到 0.1 mg），用甲醇溶解并稀 DB 43/T 2587 —2023 2 释至100mL容量瓶中，制成浓度为 100μg/mL的内标储备溶液。－18 ℃保存，有效期１年。 5.3.3 氯霉素标准中间溶液（ 1μg/mL）：精密量取 100μL氯霉素标准储备溶液，用甲醇稀释定容至 10mL容量瓶中，制成浓度为 1μg/mL的标准中间溶液。 5.3.4 氯霉素标准中间溶液 （ 100ng/mL ） ： 精密量取 1mL氯霉素标准储备溶液， 用甲醇稀释定容至 10mL 容量瓶中，制成浓度为 1μg/mL的标准中间溶液。 5.3.5 氯霉素标准中间溶液（ 10ng/mL）：精密量取 100μL氯霉素标准中间溶液（5.3.3 ），用甲醇稀 释定容至 10mL容量瓶中，制成浓度为 10ng/mL的标准中间溶液。 5.3.6 内标中间溶液（ 1μg/mL）：精密量取 100μL内标储备溶液，用甲醇稀释定容至 10mL容量瓶 中，制成浓度为 1μg/mL的内标中间溶液。 5.3.7 内标中间溶液（10ng/mL ）：精密量取 100μL内标中间溶液（5.3.4），用甲醇稀释定容至 10mL 容量瓶中，制成浓度为 10ng/mL的内标中间溶液。 材料 5.4.1 石墨化炭黑（ GCB）：40~120 μm。 5.4.2 C18固相萃取柱： 200mg/3mL ，或相当者。 5.4.3 微孔滤膜（水相）： 0.22μm。 6 仪器与设备 液相色谱 -串联质谱仪：配电喷雾离子源。 分析天平：感量 0.0001g和0.01g。 超声波清洗器。 旋涡混合器。 离心机：转速不低于 6000r/min 。 氮吹仪。 组织捣碎机。 固相萃取装置。 7 试样的制备与保存 试样的制备 取适量空白或供试样品，均质。 a) 取均质后的供试样品，作为供试试料； b) 取均质后的空白样品，作为空白试料； c) 取均质后的空白样品，添加适宜浓度的标准溶液，作为空白添加试料。 试样的保存 常温保存。 8 分析测定 提取