(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202211250966.1 (22)申请日 2022.10.12 (71)申请人 梧州市食品药品检验所 地址 543000 广西壮 族自治区梧州市万 秀 区西环路中段198号 (72)发明人 罗达龙　王华　覃蓝　许秀华　 吴琳　黄蘅　孙良广　 (74)专利代理 机构 广州海心联合专利代理事务 所(普通合伙) 44295 专利代理师 李哲瑜 (51)Int.Cl. G01N 30/02(2006.01) G01N 30/72(2006.01) G01N 30/06(2006.01) G01N 30/14(2006.01) (54)发明名称 一种高分辨质谱测定六堡茶中氨基酸类化 合物的方法 (57)摘要 本发明公开了一种高分辨质谱测定六堡茶 中氨基酸类化合物的方法， 属于茶叶成分测定的 技术领域， 利用该测定方法能够准确测定出六堡 茶样品中所含氨 基酸化合物的种类， 具有抗干扰 性好、 测定速度快、 专属性强的特点； 包括以下步 骤： (1)分别取茶类氨基酸化合物对照品经溶解、 稀释过滤后， 取对照品过滤液放入串联液质联用 仪中测定得到的图谱信息后建立对比数据库； (2)取六堡茶样品经提取、 离心、 过滤后， 取过滤 液放入串联液质联用仪中测定， 将得到的测定图 谱信息与步骤(1)的对比数据库进行匹配后得到 测定结果。 权利要求书2页 说明书7页 CN 115480017 A 2022.12.16 CN 115480017 A 1.一种高分辨质谱测定六堡茶中氨基酸类化 合物的方法， 其特 征在于， 包括以下步骤： (1)分别取茶类氨基酸化合物对照品经溶解、 稀释过滤后， 取对照品过滤液放入串联液 质联用仪中测定得到的图谱信息后建立对比数据库； (2)取六堡茶样品经提取、 离心、 过滤后， 取过滤液放入串联液质联用仪中测定， 将得到 的测定图谱信息与步骤(1)的对比数据库进行匹配后得到测定结果。 2.根据权利要求1所述的一种高分辨质谱测定六堡茶中氨基酸类化合物的方法， 其特 征在于， 所述的步骤(1)中， 所述的茶类氨基酸化合物对照品包括胱氨酸、 色氨酸、 络氨酸、 精氨酸、 苯丙氨酸、 组氨酸、 甲硫氨酸、 谷氨酸、 赖氨酸、 门冬氨酸、 亮氨酸、 异亮氨酸、 苏氨 酸、 缬氨酸、 脯氨酸、 丝氨酸、 丙氨酸、 甘 氨酸、 茶氨酸。 3.根据权利要求1或2所述的一种高分辨质谱测定六堡茶中氨基酸类化合物的方法， 其 特征在于， 所述的步骤(1)中， 称取茶类氨基酸化合物对照品使用浓度为30％的乙腈水作为 溶剂对其进行 溶解并稀释， 待用。 4.根据权利要求1所述的一种高分辨质谱测定六堡茶中氨基酸类化合物的方法， 其特 征在于， 所述的步骤(2)中， 取六堡茶样品加入浓度为30％的乙腈水中， 所加入的六堡茶样 品的质量与乙腈水的体积比为1： 20， 超声提取20min， 放至室温后在4℃下离心10min， 离心 速度为90 00r/min。 5.根据权利要求1所述的一种高分辨质谱测定六堡茶中氨基酸类化合物的方法， 其特 征在于， 所述的步骤(1)和步骤(2)中， 使用0.2 μm有机膜将溶 液过滤。 6.根据权利要求1所述的一种高分辨质谱测定六堡茶中氨基酸类化合物的方法， 其特 征在于， 所述的步骤(1)和步骤(2)的测定包括液相色谱测定和质谱测定： 所述液相色谱测定条件为： 色谱柱： 亲水作用色谱柱， 规格为2.1mm ×100mm， 2.6um； 进样量： 2 μL； 柱温： 35℃； 流速： 0.4mL/min； 流动相A为0.1％甲酸水溶液， B为乙腈； 采用梯度洗脱模式： 0～5min： 10％A～ 35％A， 90％B～65％B； 5～5.01min： 35 ％A～40％A， 65％B～60％B； 5.01～6.5min： 40 ％A～ 90％A， 60％B～10％B； 所述质谱测定条件为： 干燥气温度： 290℃； 干燥气流速： 12L/min； 雾化器压力： 45Psi； 鞘气温度： 400℃； 鞘气 流速： 11L/min； 毛细管电压： 3500V； 喷嘴电压： 1000V； 裂解电压380V； 扫描模 式为自动二级 采集模式， 正模式， 扫描范围1级5 0～500m/z， 扫描范围2级5 0～500m/z， 碰撞能量5～15V。 7.根据权利要求1所述的一种高分辨质谱测定六堡茶中氨基酸类化合物的方法， 其特 征在于， 所述的步骤(1)中， 所建立的对比数据库中包括各茶类氨基酸化合物名称、 分子式、 CAS号、 精确质荷比和二级离 子精确质荷比。 8.根据权利要求7所述的一种高分辨质谱测定六堡茶中氨基酸类化合物的方法， 其特 征在于， 将六堡茶样品的测定图谱信息与步骤(1)的对比数据库进行匹配的具体步骤为： (1)从对比数据库中逐一抽取各茶类氨基酸化合物 的精确质荷比， 从六堡茶样品的测 定图谱信息中获取其精确质荷比， 两者进行匹配， 若两个精确质荷比偏差小于5ppm， 即进入 下一步， 认为不存在该化 合物， 进行 下一茶类氨基酸 化合物的匹配； (2)从对比数据库中抽取该茶类氨基酸化合物 的二级离子精确质荷比， 从六堡茶样品 的测定图谱信息中获取其二级离子精确质荷比， 两者进行匹配， 若两个二级离子精确质荷权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 115480017 A 2比偏差小于10ppm， 即确 定含有该茶类氨基酸化合物， 否则认为不存在该化合物， 返回步骤 (1)进行下一茶类氨基酸 化合物的匹配。权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 115480017 A 3