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(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202211166882.X (22)申请日 2022.09.23 (71)申请人 司法鉴定科 学研究院 地址 200063 上海市普陀区光复西路1347 号 (72)发明人 徐多麒 沈敏 向平 严慧 纪佼佼 (74)专利代理 机构 上海申新 律师事务所 31272 专利代理师 郎祺 (51)Int.Cl. G01N 30/02(2006.01) G01N 30/06(2006.01) G01N 30/72(2006.01) (54)发明名称 一种检验单根亚毫米长度毛发中药物的方 法 (57)摘要 本发明公开了一种检验单根亚毫米长度毛 发中药物的方法, 该方法包括如下步骤: 步骤一, 将单根头发沿刻度粘贴在定制胶带上, 并在台式 放大镜下进行分割; 步骤二, 采用提取溶液对步 骤一分割后的样本进行提取, 为保证提取回收 率, 提取过程包括超声、 孵育, 提取后将提取上清 液制得样本液; 步骤三, 用液质联用仪对步骤二 所得的样本液进行液相色谱 ‑质谱分析。 本发明 实现了对单根头发进行亚毫米样 本的制备, 且样 本偏差在可接受范围内。 本发明的方法不仅可以 有效地破坏头发角质层屏障来提取头发内目标 药物, 此外还能够在最大范围内使大量结构不同 的目标检测物质溶出, 从而在检测目标不确定、 检测范围广泛时能够实现对样本中的多种毒 (药)物的快速 筛查。 权利要求书1页 说明书6页 附图1页 CN 115452995 A 2022.12.09 CN 115452995 A 1.一种检验单根 亚毫米长度毛发中药物的方法, 其特 征在于, 包括如下步骤: 步骤一, 将单根头发沿刻度粘贴在定制胶带 上, 并在台 式放大镜下进行分割; 步骤二, 采用水溶性有机溶剂和水溶性蛋白酶的混合溶液作为提取溶液对步骤一分割 后的样本进行提取, 为保证提取回收率, 提取过程包括超声、 孵育, 提取后将提取上清液制 得样本液; 步骤三, 用液质联用仪对步骤二所 得的样本液进行 液相色谱 ‑质谱分析。 2.根据权利要求1所述的检验单根亚毫米长度毛发中药物的方法, 其特征在于, 步骤一 中, 所述定制胶带采用的定制精度为0.1 ‑1.0mm。 3.根据权利要求2所述的检验单根亚毫米长度毛发中药物的方法, 其特征在于, 步骤一 中, 所述定制胶带采用的定制精度为0.4m m。 4.根据权利要求1所述的检验单根亚毫米长度毛发中药物的方法, 其特征在于, 步骤一 中, 所述台 式放大镜的放大倍数为3 0×。 5.根据权利要求1所述的检验单根亚毫米长度毛发中药物的方法, 其特征在于, 步骤二 中, 所述水溶性有机溶剂为甲醇、 乙腈和2mM甲酸铵混合而成的EM溶液; 所述水溶性蛋白酶 为二硫苏糖醇DT T。 6.根据权利要求5所述的检验单根亚毫米长度毛发中药物的方法, 其特征在于, 所述EM 溶液中甲醇、 乙腈、 2mM甲酸铵的体积比为25: 25: 5 0(v/v/v)。 7.根据权利要求5所述的检验单根亚毫米长度毛发中药物的方法, 其特征在于, 步骤二 中, EM‑DTT溶液中二硫苏糖醇的浓度为1 ‑100mg/mL。 8.根据权利要求1所述的检验单根亚毫米长度毛发中药物的方法, 其特征在于, 步骤二 中, 所述提取溶液的体积为25 ‑50 μL。 9.根据权利要求1所述的检验单根 亚毫米长度毛发中药物的方法, 其特 征在于, 步骤二中, 所述超声的温度为15 ‑35℃, 时间为3 0‑60min; 所述孵 育的时间为10 ‑20h。权 利 要 求 书 1/1 页 2 CN 115452995 A 2一种检验单根亚毫米长度毛发中药物的方 法 技术领域 [0001]本发明涉及痕量药物检测技术领域, 尤其涉及一种检验单根亚毫米长度毛发中药 物的方法。 背景技术 [0002]自20世纪90年代末以来, 毛发分析已越来越多地应用于法医、 临床及反兴奋剂领 域。 与传统的尿液和血液等生物基质相比, 毛发分析具有样本收集无创、 简便, 毒(药)物检 测时间窗长等突出优势。 因此, 毛发分析结果在案件调查中常作为重要的证据, 为案件提供 侦察方向及时间信息。 既往的分析方法集中在对簇发进行片段分析, 多选用2~3cm长度作 为间隔分割。 传统的分割模式仅能对一段时间段内的摄药情况进行分析, 不能够得到确切 的时间信息。 因此, 实际工作中, 迫切需要一种能够对单次摄入药物后, 对头发中微量药物 的分析方法。 发明内容 [0003]本发明的目的是针对现有技 术中的不足, 提供。 [0004]为实现上述目的, 本发明采取的技 术方案是: [0005]本发明提供一种检验单根 亚毫米长度毛发中药物的方法, 包括如下步骤: [0006]步骤一, 将单根头发沿刻度粘贴在定制胶带 上, 并在台 式放大镜下进行分割; [0007]步骤二, 采用水溶性有机溶剂和水溶性蛋白酶的混合溶液作为提取溶液对步骤一 分割后的样本进行提取, 为保证提取回收率, 提取过程包括超声、 孵育, 提取后将提取上清 液制得样本液; [0008]步骤三, 用液质联用仪对步骤二所 得的样本液进行 液相色谱 ‑质谱分析。 [0009]进一步地, 步骤一中, 所述定制胶带采用的定制精度为0.1 ‑1.0mm。 [0010]进一步优选地, 步骤一中, 所述定制胶带采用的定制精度为0.4m m。 [0011]进一步地, 步骤一中, 所述台 式放大镜的放大倍数为3 0×。 [0012]本发明经过大量实验发现, 上述步骤一的方法能够较为准确、 便捷的将单根毛发 进行亚毫米级分割、 收集。 采用其他的样品制备方法, 在实际操作、 样本稳定性、 收集等方面 均存在一定难题。 本发明对样本长度不作严格限制, 在实施方式中, 所述样本可以为0.1 ‑ 1mm。 对定制胶带的材质、 类别不作严格限制, 在实施过程中, 可以为透明胶带、 非透明胶带、 纸质材质、 塑料 材质等。 [0013]进一步地, 步骤二中, 所述水溶性有机溶剂为甲醇、 乙腈和2mM甲酸铵混合而成的 EM溶液; 所述水 溶性蛋白酶为 二硫苏糖醇DT T。 [0014]本发明经大量研究发现, 与其他多种有机试剂相比, 采用EM ‑DTT溶剂可获得高提 取回收率, 优势明显。 采用EM ‑DTT溶液时, 通过破坏头发角质层屏障来提取头发内目标药 物。 [0015]进一步优选地, 所述EM溶液中甲醇、 乙腈、 2mM甲酸铵的体积比为25: 25: 50(v/v/说 明 书 1/6 页 3 CN 115452995 A 3
专利 一种检验单根亚毫米长度毛发中药物的方法
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