(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202211342852.X (22)申请日 2022.10.31 (71)申请人 威胜生物医药 （苏州） 股份有限公司 地址 215634 江苏省苏州市张家港扬子江 化工园南京中路2号 (72)发明人 彭学东　张梅　赵金召　 (74)专利代理 机构 北京精金石知识产权代理有 限公司 1 1470 专利代理师 张天琦 (51)Int.Cl. G01N 30/02(2006.01) (54)发明名称 一种检测它波宁盐酸盐有关物质及含量的 高效液相色谱法 (57)摘要 本发明公开了一种检测它波宁盐酸盐有关 物质及含量的高效液相色谱法， 属于药物分析技 术领域。 首先， 本发明提供了一种检测它波宁盐 酸盐及其有关物质的方法， 并且提供了具体的色 谱条件。 按照本发明提供的色谱条件， 它波宁盐 酸盐及其有关物质的分离效果好， 检验结果准 确。 本发明提供的检验 方法能应用在它波宁盐酸 盐的精制工艺过程中， 为它波宁盐酸盐的质量控 制提供了科 学、 高效的方法学依据。 权利要求书2页 说明书8页 附图2页 CN 115389680 A 2022.11.25 CN 115389680 A 1.一种检测它波宁盐酸盐及其有关物质的方法， 其特征在于， 使用高效液相色谱法进 行测定， 包括以下步骤： 步骤1、 色谱柱以十八烷基硅烷键合硅胶为 填充剂； 步骤2、 以乙酸铵水 溶液为流动相A， 乙腈 为流动相B， 进行梯度洗脱； 步骤3、 取系统适用性溶 液、 对照品溶 液和供试品溶液进样测试； 步骤4、 取系统适用性溶液进行色谱分析， 按面积归一化法计算它 波宁盐酸盐有关物质 的含量； 步骤5、 取对照品溶液、 供试品溶液进行色谱分析， 按外标法计算供试品中它波宁盐酸 盐的含量。 2.根据权利要求1所述的方法， 其特 征在于， 所述高效液相色谱法的色谱条件设置为： 流动相流速： 1.0mL/mi n； 柱箱温度： 3 0℃； 进样量： 5 ‑20 μL； 检测波长： 190 ‑400nm。 3.根据权利要求1所述的方法， 其特征在于， 步骤1中所述填充剂的粒径为2.1 ‑5.0μm； 所述色谱柱的长度为10 0mm或150mm， 内径为 4‑5 μm。 4.根据权利 要求1所述的方法， 其特征在于， 步骤2中所述乙酸铵水溶液的浓度为0.01 ‑ 0.1mol/L。 5.根据权利要求1所述的方法， 其特征在于， 步骤2中所述梯度洗脱的程序 为： 0‑20min， 乙腈体积分数由25% 变为90%； 20 ‑38min， 乙腈体积分数为90%保持不变； 38 ‑40min， 乙腈体积 分数由90%变为25%； 40 ‑45min， 乙腈体积分数为25%保持不变。 6.根据权利要求1所述的方法， 其特征在于， 步骤3中所述进样测试中各溶液的稀释剂 均为乙腈与水的混合溶 液。 7.根据权利要求1所述的方法， 其特征在于， 步骤3中所述系统适用性溶液、 对照品溶 液、 供试品溶液中它波宁盐酸盐浓度均为0.01 ‑2mg/mL的溶 液。 8.根据权利要求7所述的方法， 其特征在于， 所述系统适用性溶液中它 波宁盐酸盐的有 关物质包括杂质 Ⅰ、 杂质Ⅱ、 杂质Ⅲ， 所述杂质 Ⅰ、 杂质Ⅱ、 杂质Ⅲ的结构如下：权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 115389680 A 2。 9.根据权利要求8所述的方法， 其特征在于， 所述有关物质占它 波宁盐酸盐的质量百分 比为0.2‑0.5%。 10.权利要求1 ‑9任一项所述的方法在检测它波宁盐酸盐的粗品、 干品、 精制品中的应 用。权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 115389680 A 3