(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202211244886.5 (22)申请日 2022.10.12 (71)申请人 钛和 （杭州） 医药技 术服务有限公司 地址 311121 浙江省杭州市余杭区仓前街 道龙潭路16号1幢北3层东区 (72)发明人 黄荣　姜鑫　朱天强　刘子阳　 (74)专利代理 机构 北京志霖恒远知识产权代理 有限公司 1 1435 专利代理师 戴莉 (51)Int.Cl. G01N 30/02(2006.01) G01N 30/72(2006.01) G01N 30/86(2006.01) (54)发明名称 一种奥拉帕利一水合物中3-溴苯酞的检测 方法 (57)摘要 本发明公开了一种奥拉帕利一水合物中3 ‑ 溴苯酞的检测方法， 包括以下步骤： 步骤S1： 得到 衍生溶剂， 并将衍生溶剂溶解于甲醇中作为空白 溶液； 步骤S2： 供试品溶液； 步骤S3： 对照品溶液； 步骤S4： 依次将空白溶液、 供试品溶液、 对照品溶 液注入LC ‑MS系统， 记录对照品溶液主峰峰面积 以及供试品溶液中与对照品溶液保留时间一致 的峰面积， 采用外标法计算供试品中的3 ‑溴苯酞 含量。 本发 明通过选取特定的衍生溶剂将供试品 衍生化后， 采用LC ‑MS/MS方法， 在本发明开发的 色谱和质谱 条件下， 实现奥拉帕利一水合物中遗 传毒性杂质3 ‑溴苯酞的有效检测， 该方法的准确 度、 精密度、 重现性、 线性、 溶液稳定性均符合要 求。 能降低遗传毒性杂质对人体的危害， 为安全 用药提供保障。 权利要求书1页 说明书7页 附图3页 CN 115541763 A 2022.12.30 CN 115541763 A 1.一种奥拉帕利一水合物中3 ‑溴苯酞的检测方法， 其特 征在于， 包括以下步骤： 步骤S1： 将哌啶溶解于甲醇中进行稀释、 混合均匀， 得到衍生溶剂， 并将衍生溶剂溶解 于甲醇中作为空白溶 液； 步骤S2： 将奥拉帕利一水合物溶于甲醇形成奥拉帕利溶液， 并将衍生溶剂与奥拉帕利 溶液按照体积比为1:10 ‑1:200的比例进行均匀混合， 作为供 试品溶液； 步骤S3： 将3 ‑溴苯酞溶解于甲醇得到浓度为2.5ng/ml的3 ‑溴苯酞溶液， 并将衍生溶剂 与3‑溴苯酞溶 液按照体积比为1:5 ‑1:50的比例进行均匀混合， 作为对照品溶 液； 步骤S4： 依次将空白溶液、 供试品溶液、 对照品溶液注入LC ‑MS系统， 记录对照品溶液主 峰峰面积以及供试品溶液中与对照品溶液保留时间一致的峰面积， 采用外标法计算供试品 中的3‑溴苯酞含量。 2.如权利要求1所述的一种奥拉帕利一水合物中3 ‑溴苯酞的检测方法， 其特征在于， 所 述步骤S1中衍 生溶剂的哌啶的体积与甲醇的体积比为1:5 ‑1:50。 3.如权利要求1所述的一种奥拉帕利一水合物中3 ‑溴苯酞的检测方法， 其特征在于， 所 述LC‑MS系统所使用的色谱柱为反相C18柱， 流动相由0.1%甲酸水 溶液和甲醇组成。 4.如权利要求1所述的一种奥拉帕利一水合物中3 ‑溴苯酞的检测方法， 其特征在于， 所 述LC‑MS系统中采用梯度洗脱， 所述梯度洗脱的流速为0.3mL/min、 柱温为30℃、 样品盘温度 为4℃、 狭缝宽为1.2nm。 5.如权利要求4所述的一种奥拉帕利一水合物中3 ‑溴苯酞的检测方法， 其特征在于， 所 述梯度洗脱的程序以体积比计， 0至3分钟， 流动相A为95%， 流动相B为5%； 3至11分钟， 流动相 A相为10%， 流动相B相为90%； 11至12.5分钟， 流动相A相为10%， 流动相B相为90%； 12.5至 12.51分钟， 流动相A相为95%， 流动相B相为5%； 12.51至15分钟， 流动相A相为95%， 流动相B相 为5%。 6.如权利要求1所述的一种奥拉帕利一水合物中3 ‑溴苯酞的检测方法， 其特征在于， 所 述LC‑MS系统的质谱 条件为： 离子源为AJS ‑ESI， 离子模式为正离子， 采集模式为多反应监测 MRM。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115541763 A 2一种奥拉帕利一 水合物中3 ‑溴苯酞的检测方 法 技术领域 [0001]本发明涉及一种药物分析技术领域， 尤其涉及一种奥拉帕利一水合物中3 ‑溴苯酞 的检测方法。 背景技术 [0002]奥拉帕利 （Olaparib） 是英国阿斯利康公司和德 国艾伯维公司合作生产一种口服 多聚二磷酸腺苷核糖聚合酶 （PARP） 抑制剂， 利用肿瘤DNA损伤反应 （DDR） 途径的缺陷， 优先 杀死癌细胞。 该药于2014年 12月在美国获FDA批准， 用于治疗既往接受过两次以上治疗且携 带种系BRCA突变的晚期卵巢癌患者， 成为全球首个获批的PARP抑制剂。 随后欧盟、 日本等多 地获批， 且适应症不断扩大， 目前已经覆盖乳腺癌、 卵巢癌、 输卵管癌、 腹膜癌和胰腺癌。 2018年8月23日， 国家药品监督管理局正式批准卵巢癌靶向药物奥拉帕利在中 国上市， 成为 在我国国内上市的首款PARP抑制剂。 奥拉帕利更 是被纳入我国2019医保目录 。 [0003]目前国内外未见有对奥拉帕利中潜在基因毒性杂质3 ‑溴苯酞分析方法的研究， 因 此， 研发出一种能够有效检测出遗传毒性杂质3 ‑溴苯酞， 且符合操作简单、 试剂易得、 重现 性、 线性和回收率 好， 环境污染小的方法非常有意 义。 [0004]遗传毒性杂质的化学 结构如下： 杂质名称3 ‑溴苯酞 化学结构式： 分子式C8H5BrO2 分子量213.0 3 化学文摘号6940 ‑49‑4 目前， 国内外文献尚未见到奥拉帕利一水合物中遗传毒性杂质3 ‑溴苯酞检测方法 报道。 发明内容 [0005]本发明为了解决上述技术问题， 提供一种奥拉帕利一水合物中3 ‑溴苯酞的检测方 法。 [0006]本发明采用的技 术方案如下： 一种奥拉帕利一水合物中3 ‑溴苯酞的检测方法， 包括以下步骤：说　明　书 1/7 页 3 CN 115541763 A 3