(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202211279598.3 (22)申请日 2022.10.19 (71)申请人 四川科伦药业股份有限公司 地址 610500 四川省成 都市新都区卫星 城 工业开发区南 二路 (72)发明人 蔡凯　刘文军　袁南南　蔡作清　 雷雨田　金美琪　杨广财　李燕霞　 周怡　罗冬钰　刘思川　谭鸿波　 郭晓英　王亮　 (74)专利代理 机构 成都行之专利代理事务所 (普通合伙) 51220 专利代理师 李朝虎 (51)Int.Cl. G01N 30/02(2006.01) G01N 30/06(2006.01)G01N 30/34(2006.01) G01N 30/74(2006.01) G01N 30/86(2006.01) (54)发明名称 一种复方氨基酸注 射液中色氨 酸杂质G的检 测方法及其应用 (57)摘要 本发明公开了一种复方氨基酸注射液中色 氨酸杂质G的检测方法及其应用， 属于分析化学 领域。 其检测方法， 包括： 采用高效液相色谱法， 色谱条件包括： 采用十八烷基硅烷键合硅胶填充 剂的色谱柱， 用流动相进行梯度洗脱， 紫外检测 器检测。 本发明通过对流动相比例及pH、 流速、 柱 温、 波长等色谱条件的筛选优化， 有效改善了色 氨酸杂质G的峰形及分离度， 并实现了该杂质准 确的定量检测。 该检测方法经过系统的方法学验 证， 具有专属性强、 灵敏度高、 精密度好、 耐用性 强等优点， 可定性或可定量检测出复方氨基酸注 射液中色氨酸杂质G， 从而提高相关复方氨基酸 注射液临床用药的安全性。 权利要求书1页 说明书10页 附图1页 CN 115541767 A 2022.12.30 CN 115541767 A 1.一种复方氨基酸注射液中色氨酸杂质G的检测方法， 其特征在于， 包括： 采用高效液 相色谱法， 色谱条件包括： 采用十 八烷基硅烷键合硅胶填充剂的色谱柱， 用流动相进 行梯度 洗脱， 紫外检测器检测， 检测波长为2 00nm‑210nm， 流动相流速为0.7ml/min～ 0.9ml/min， 进 样量为10 μl～ 20 μl， 柱温为3 3℃～37℃； 其中， 色氨酸杂质G为(2S) ‑氨基‑3‑(2‑羟基‑1H‑吲哚‑3‑基)丙酸(2 ‑羟基色氨酸)； 所述流动相由流动相A和流动相B组成， 流动相A： 甲醇与磷酸盐缓冲溶液的混合溶液； 流动相B： 乙腈水 溶液。 2.根据权利要求1所述的复方氨基酸注射液中色氨酸杂质G的检测方法， 其特征在于， 所述流动相A为甲醇和浓度为0.01mol/L～0.03mol/L的磷酸盐缓冲溶液的混合溶液； 其中， 磷酸盐缓冲溶 液与甲醇的体积比为95： 5～ 99： 1。 3.根据权利要求2所述的复方氨基酸注射液中色氨酸杂质G的检测方法， 其特征在于， 所述磷酸盐缓冲溶 液的磷酸盐包括磷酸 二氢钠和/或磷酸 二氢钾。 4.根据权利要求1所述的复方氨基酸注射液中色氨酸杂质G的检测方法， 其特征在于， 所述流动相A的pH＝7.5～8.5 。 5.根据权利要求4所述的复方氨基酸注射液中色氨酸杂质G的检测方法， 其特征在于， 所述流动相A采用氢 氧化钾和/或氢氧化钠调节pH 。 6.根据权利要求1所述的复方氨基酸注射液中色氨酸杂质G的检测方法， 其特征在于， 所述流动相B中乙腈与水的体积比为3 0： 70～50： 50。 7.根据权利要求1所述的复方氨基酸注射液中色氨酸杂质G的检测方法， 其特征在于， 所述梯度洗脱的条件为： 时间： 0mi n， 95～10 0％的流动相A， 0～5％的流动相B； 时间： 20mi n， 95～10 0％的流动相A， 0～5％的流动相B； 时间： 23mi n， 0～5％的流动相A， 95～10 0％的流动相B； 时间： 28mi n， 0～5％的流动相A， 95～10 0％的流动相B； 时间： 30min， 95～10 0％的流动相A， 0～5％的流动相B； 时间： 45mi n， 95～10 0％的流动相A， 0～5％的流动相B。 8.根据权利要求1所述的复方氨基酸注射液中色氨酸杂质G的检测方法， 其特征在于， 所述检测波长为20 5nm。 9.根据权利要求1所述的复方氨基酸注射液中色氨酸杂质G的检测方法， 其特征在于， 所述流动相流速为0.8ml/mi n。 10.权利要求1 ‑9任一项所述的复方氨基酸注射液中色氨酸杂质G的检测方法在检测复 方氨基酸注射液中色氨酸杂质G中的应用。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115541767 A 2一种复方氨基酸注射液中色氨酸杂质G的检测方 法及其应用 技术领域 [0001]本发明涉及分析化学领域， 具体涉及一种复方氨基酸注射液中色氨酸杂质G的检 测方法及其应用。 背景技术 [0002]复方氨基酸注射液为常见的一种肠外营养注射液， 在临床上应用范围较广。 由于 其成分复杂， 尤其是其中的色氨酸易氧化降解导致产生杂质， 导致产品质量不稳定， 进而影 响患者的用药安全， 故 需要对其中的色氨酸降解杂质进 行研究。 其中杂质G是其主要降解杂 质之一， 其结构式如下： [0003] [0004]现有文献资料中， EP中收载有色氨酸原料的有关物质的检测方法， 但该方法检测 色氨酸杂质G存在分离度差、 峰形较差等问题， 色氨酸杂质G峰形十 分扁平， 且与前面的色谱 峰分离效果不好， 导致积分难度变大， 实际检测结果不准确。 而对方法进 行优化则可能会影 响其他杂质的检测， 故需要单独建立 一种方法针对色氨酸杂质G进行检测。 发明内容 [0005]本发明的目的在于提供一种复方氨基酸注射液中色氨酸杂质G的检测方法及 其应 用， 以解决目前缺少针对色氨 酸杂质G的检测方法， 实现可定性或可定量地检测出复方氨基 酸注射液中色氨酸杂质G， 从而保证了复方氨基酸注射液的质量、 提高临床用药的安全性。 [0006]本发明通过 下述技术方案实现： [0007]一种复方氨基酸注射液中色氨酸杂质G的检测方法， 包括： 采用高效液相色谱法， 色谱条件包括： 采用十 八烷基硅烷键合硅胶填充剂的色谱柱， 用流动相进 行梯度洗脱， 紫外 检测器检测， 检测波长为200n m‑210nm， 流动相流速为0.7ml/min～ 0.9ml/min， 进样量为10 μ l～20 μl， 柱温为3 3℃～37℃； [0008]其中， 色氨酸杂质G为( 2S)‑氨基‑3‑(2‑羟基‑1H‑吲哚‑3‑基)丙酸(2 ‑羟基色氨 酸)； [0009]所述流动相由流动相A和流动相B组成， 流动相A： 甲醇与 磷酸盐缓冲溶液的混合溶 液； 流动相B： 乙腈水 溶液。 [0010]进一步地， 在本发明较佳的实施例中， 所述流动相A为甲醇和浓度为0.01mol/L～ 0.03mol/L的磷酸盐缓冲溶液的混合溶液； 其中， 磷酸盐缓冲溶液与甲醇的体积比为95： 5～ 99： 1。 [0011]进一步地， 在本发明较佳的实施例中， 所述磷酸盐缓冲溶液的磷酸盐包括磷酸二 氢钠和/或磷酸 二氢钾。 [0012]进一步地， 在本发明较佳的实施例中， 所述 流动相A的pH＝7.5～8.5 。说　明　书 1/10 页 3 CN 115541767 A 3