(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202211266752.3 (22)申请日 2022.10.17 (71)申请人 山东省食品药品检验研究院 地址 250101 山东省济南市高新区新 泺大 街2749号 (72)发明人 刘广桢　林林　张雷　刘琦　 谭乐俊　 (74)专利代理 机构 北京元本知识产权代理事务 所(普通合伙) 11308 专利代理师 徐苹 (51)Int.Cl. G01N 30/02(2006.01) G01N 30/06(2006.01) G01N 30/34(2006.01) G01N 30/72(2006.01)G01N 30/86(2006.01) (54)发明名称 一种同时鉴别通络化痰胶囊中五种原料药 的检测方法 (57)摘要 本发明属于药品检测技术领域， 尤其涉及一 种同时鉴别通络化痰胶囊中五种原料药的检测 方法。 所述检测方法包括以下步骤： 制备供试品 溶液， 采用UPLC ‑Q‑Orbitrap高效液相色谱质谱 联用仪， 按照确定的色谱和质谱条件进行检测， 本发明所述检测方法按照保留时间和精确质量 数进行鉴别， 可以同时进行通络化痰胶囊中熊胆 粉、 天麻、 三七、 丹参和大黄五种原料药的检测， 简单、 易操作， 准确度高， 分析时间短， 重现性好， 可用于通络化痰 胶囊的质量控制。 权利要求书2页 说明书5页 附图8页 CN 115494181 A 2022.12.20 CN 115494181 A 1.一种同时鉴别通络化痰胶囊中五种原料药的检测方法， 其特征在于利用UPLC ‑Q‑ Orbitrap同时鉴别通络化痰 胶囊中熊胆粉、 天麻、 三七、 丹参和大黄五种原料 药。 2.根据权利要求1所述的同时鉴别通络化痰胶囊中五种原料药的检测方法， 其特征在 于， 包括以下步骤： (1)制备供试品溶液、 对照药 材溶液和对照品溶 液； (2)按照确定的色谱和质谱条件注入仪器， 进行检测； (3)按照保留时间和精确质量数进行鉴别。 3.根据权利要求2所述的同时鉴别通络化痰胶囊中五种原料药的检测方法， 其特征在 于， 步骤(1)中所述供试品溶液的具体制备方法为： 取通络化痰胶囊内容物0.4g， 精密称 定， 加入80％甲醇25ml， 超声处 理30分钟， 放冷， 摇匀， 滤 过， 取续滤 液， 即得。 4.根据权利要求2所述的同时鉴别通络化痰胶囊中五种原料药的检测方法， 其特征在 于， 步骤(1)中所述对照药材溶液的具体制备方法为： 取熊胆粉、 天麻、 三七、 丹参和大黄对 照药材， 分别加80％甲醇25ml， 超声处 理30分钟， 放冷， 摇匀， 滤 过， 取续滤 液， 即得。 5.根据权利要求2所述的同时鉴别通络化痰胶囊中五种原料药的检测方法， 其特征在 于， 步骤(1)中所述对照品溶液的具体制备方法为： 取牛黄熊去氧胆酸、 牛黄鹅去氧胆酸、 天麻素、 三七皂苷R1、 人参皂苷Rg1、 人参皂苷Rb1、 丹酚酸B、 丹参酮IIA、 大黄素、 大黄酚和大 黄酸对照品， 分别加80％甲醇制成10 μg/ml的对照品溶 液， 即得。 6.根据权利要求2所述的同时鉴别通络化痰胶囊中五种原料药的检测方法， 其特征在 于， 步骤(2)中所述色谱 条件为： 以乙腈为流动相A， 以体积分数比0.05％甲酸溶液为流动相 B， 采用梯度洗脱方式： 0 →5min， 乙腈10％ →11％； 5→12min， 乙腈11％ →35％； 12→18min， 乙腈35％→70％； 18→27min， 乙腈70％ →85％， 流速： 0.5ml/mi n。 7.根据权利要求2所述的同时鉴别通络化痰胶囊中五种原料药的检测方法， 其特征在 于， 步骤(2)中所述质谱条件为： FullMS(m/z  90‑1350)， 电喷雾离子模式(ESI+、 ESI‑)， 分辨 率70000； 所述色谱柱为： Waters  cortecs C18， 4.6×150mm， 2.7 μm； 柱温： 40℃。 8.根据权利要求2所述的同时鉴别通络化痰胶囊中五种原料药的检测方法， 其特征在 于， 步骤(2)中所述仪器为UPLC ‑Q‑Orbitrap。 9.根据权利要求2所述的同时鉴别通络化痰胶囊中五种原料药的检测方法， 其特征在 于， 步骤(3)中所述具体的鉴别操作为： 在保留时间15.93min和17.09min处均出现精确质量数为498.2883([M ‑H]‑)色谱峰， 则 待测通络化痰胶囊样品中含有熊胆粉， 如果在 对应保留时间内缺 失两个色谱峰中的任一色 谱峰， 则待测通络化痰 胶囊样品中不含有 熊胆粉； 在保留时间3.28min处出现精确质量数为331.1024([M+COOH]‑)色谱峰， 则待测通络化 痰胶囊样品中含有天麻， 如果在对应保留时间内缺失该色谱 峰， 则待测 通络化痰胶囊样品 中不含有天麻； 在保留时间13.65min、 14.07min和16.18min处分别出现精确质量数为977.5327([M+ COOH]‑)、 845.49 04([M+COOH]‑)和1153.6011([M+COOH]‑)色谱峰， 则待测通络化痰胶囊样品权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 115494181 A 2中含有三七， 如果在对应保留时间内缺失三个色谱 峰中的任一色谱 峰， 则待测通络化痰胶 囊样品中不含有三七； 在保留时间13.48min和26.53min处分别出现精确质量数为717.1461([M ‑H]‑)和 295.1329([M+H]+)色谱峰， 则待测通络化痰胶囊样品中含有丹参， 如果在对应保留时间内 缺失两个色谱峰中的任一色谱峰， 则待测通络化痰 胶囊样品中不含有丹参； 在保留时间15.48min、 18.48min和21.58min处分别出现精确质量数为253.0506([M ‑ H]‑)、 283.0248([M ‑H]‑)和269.0455([M ‑H]‑)色谱峰， 则待测通络化痰胶囊样品中含有大 黄， 如果在对应保留时间内缺失三个色谱 峰中的任一色谱 峰， 则待测通络化痰胶囊样品中 不含有大黄 。 10.根据权利要求9所述的同时鉴别通络化痰胶囊中五种原料药的检测方法， 其特征在 于， 所述保留时间误差在 ±5％以内， 质量数偏差在 ±5ppm以内。权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 115494181 A 3